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MDA-MB-231-GFP-Puro+ffluc稳转株
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详细内容
MDA-MB-231-GFP-Puro+ffluc稳转株
产品名称 | MDA-MB-231-GFP-ffluc1-Puro稳转细胞株 |
产品货号 | XY-H2193 |
中文名称 | ffluc1、GFP双标的MDA-MB-231稳转细胞株 |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | (1)构建目的基因过表达慢病毒重组质粒,并包装慢病毒; (2)慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞; (3)用最佳浓度药物对细胞株进行筛选,获得混合稳转细胞株; (4)稳转细胞株质检(COA)。 |
完全培养基 | L-15 + 10% FBS + 1% P/S(选择添加) |
培养条件 | (1) 气相:100%空气;(2) 温度:37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |
共享方式 | 公益性共享 |

MDA-MB-231-GFP-Puro+ffluc 稳转株概述
MDA-MB-231 细胞是一种人源乳腺癌细胞系,具有高侵袭性和转移性,常用于癌症研究(如肿瘤生长、转移机制、药物筛选等)。
** 稳转株(Stable Cell Line)** 是指通过基因工程技术将外源基因稳定整合到细胞基因组中,使其能够长期表达特定蛋白或标记的细胞株。
关键标记与特性
GFP(绿色荧光蛋白)
作用:作为可视化标记,便于通过荧光显微镜观察细胞形态、分布及迁移,或通过流式细胞术(FACS)进行细胞分选和纯度鉴定。
应用场景:实时追踪细胞在体外培养或体内(如动物模型)的动态变化。
Puro(嘌呤霉素抗性基因)
作用:用于稳转株的筛选和维持。嘌呤霉素是一种抗生素,可杀死未成功整合抗性基因的细胞,确保稳转株的纯度。
使用方法:在细胞转染后,通过添加嘌呤霉素进行压力筛选,存活细胞即为成功整合外源基因的稳转株。
ffluc(萤火虫荧光素酶)
作用:作为生物发光标记,通过荧光素酶与底物(如荧光素)的反应产生光信号,可通过活体成像系统(如 IVIS)定量检测细胞数量、肿瘤生长或转移情况。
优势:检测灵敏度高,适用于活体动物体内的非侵入性实时监测(如小鼠肿瘤模型)。
构建流程与技术要点
载体构建
将 GFP、Puro 抗性基因和 ffluc 基因克隆至同一质粒载体中,通常使用慢病毒或逆转录病毒载体(因整合效率高,适合难转染的细胞如 MDA-MB-231)。
细胞转染与筛选
通过病毒感染将载体导入 MDA-MB-231 细胞,随后用嘌呤霉素筛选数天,直至未转染细胞全部死亡,存活细胞即为稳转株。
鉴定与验证
荧光检测:通过荧光显微镜观察 GFP 表达,确认细胞携带标记。
生物发光检测:加入荧光素后检测发光强度,验证 ffluc 活性。
稳定性验证:传代培养数代后,检测标记基因的表达是否稳定,避免因传代丢失。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
热门标签:MDA-MB-231-GFP-Puro+ffluc稳转株,ffluc1,GFP双标的MDA-MB-231稳转细胞株,MDA-MB-231稳转细胞株















