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KYSE-150-Puro+ffluc稳转株
价格：￥ 3200
品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/19 10:48:35
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详细内容
KYSE-150-Puro+ffluc稳转株
产品名称 | KYSE-150-Puro+ffluc 稳转株 |
产品货号 | XY-H2195 |
中文名称 | ffluc 标记的 KYSE-150 稳转株 |
Lot number | KYSE-150-24D3P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | （1）构建目的基因过表达慢病毒重组质粒，并包装慢病毒； （2）慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞； （3）用最佳浓度药物对细胞株进行筛选，获得混合稳转株； （4）稳转株质检（COA）。 |
完全培养基 | RPMI-1640 + 10% FBS + 1% P/S（选择添加） |
培养条件 | (1) 气相：95%空气，5% CO2；(2) 温度：37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |
一、基本背景
细胞系来源：KYSE-150 是一种人食管鳞癌细胞系，来源于食管鳞状细胞癌患者的肿瘤组织，常用于食管癌的基础研究和药物开发等领域。
稳转株构建目的：通过基因工程技术将带有特定标记（如 Puro 抗性基因和 ffluc 荧光素酶基因）的外源质粒稳定转染到 KYSE-150 细胞中，使其能够稳定表达相关基因，便于后续的实验研究，如细胞追踪、药物筛选、体内成像等。
二、关键基因与标记说明
Puro（嘌呤霉素抗性基因）
作用：作为筛选标记，在稳转株构建过程中，利用嘌呤霉素对细胞进行筛选，只有成功整合外源质粒并表达 Puro 抗性基因的细胞才能存活，从而获得稳定转染的细胞株。
应用场景：常用于维持稳转株在体外培养过程中质粒的稳定性，防止未转染细胞过度生长。
ffluc（荧光素酶基因）
原理：ffluc 基因表达的荧光素酶可催化荧光素底物发生化学反应，产生生物发光。通过光学成像系统（如活体成像仪）可检测到发光信号，从而实现对细胞的实时追踪和定量分析。
典型应用：
体内肿瘤研究：将稳转株接种到动物模型（如裸鼠）体内，通过活体成像监测肿瘤的生长、转移及对治疗的反应。
细胞示踪：在细胞移植或侵袭实验中，利用发光信号追踪细胞的分布和迁移路径。
三、稳转株的构建流程（简要示意）
质粒构建：将 Puro 抗性基因和 ffluc 基因插入到合适的载体（如慢病毒载体、逆转录病毒载体）中，构建重组质粒。
细胞转染：通过病毒感染（慢病毒 / 逆转录病毒）或化学转染（如脂质体转染）等方法，将重组质粒导入 KYSE-150 细胞。
筛选与扩增：使用嘌呤霉素进行药物筛选，存活的细胞经过克隆化培养（如有限稀释法），获得单克隆稳转株。
鉴定与验证：
分子水平：通过 PCR、Western blot 检测目的基因（Puro、ffluc）的表达。
功能水平：利用荧光素酶活性检测（如 Luciferase Assay）验证发光能力，确保稳转株符合实验要求。
仅用于科研，不能用于临床诊断！所有产品仅供科研使用，不得用于人或动物的治疗等任何其他用途，不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。
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