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KYSE-150-GFP-Puro+ffluc稳转株
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详细内容
KYSE-150-GFP-Puro+ffluc稳转株
英文名称 | KYSE-150-GFP-Puro+ffluc polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-H2196 |
中文名称 | ffluc 和 GFP 双标的 KYSE-150 稳转株 |
Lot number | KYSE-150-3B6P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | (1)构建目的基因过表达慢病毒重组质粒,并包装慢病毒; (2)慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞; (3)用最佳浓度药物对细胞株进行筛选,获得混合稳转株; (4)稳转株质检(COA)。 |
完全培养基 | RPMI-1640 + 10% FBS + 1% P/S(选择添加) |
培养条件 | (1) 气相:95%空气,5% CO2;(2) 温度:37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |

关键标签与功能
GFP(绿色荧光蛋白)
功能:作为可视化标记,便于通过荧光显微镜观察细胞形态、定位及迁移,或通过流式细胞术(FACS)进行细胞分选。
应用场景:追踪细胞在体内外的分布(如肿瘤模型中的转移研究)、监测转染效率。
Puro(嘌呤霉素抗性基因)
功能:用于稳转株的筛选。含有 Puro 抗性基因的细胞可在嘌呤霉素存在的培养基中存活,未成功整合外源基因的细胞则被淘汰。
ffluc(萤火虫荧光素酶)
功能:作为报告基因,通过荧光素酶反应产生生物发光,可通过活体成像系统定量检测细胞数量、肿瘤生长或药物疗效。
应用场景:体内肿瘤模型(如小鼠移植瘤)的非侵入性实时监测,评估治疗效果。
主要应用领域
1. 肿瘤生物学研究
体内成瘤实验:通过 ffluc 发光检测肿瘤体积变化,分析肿瘤生长动力学。
转移机制研究:利用 GFP 荧光标记观察肿瘤细胞向淋巴结、肝肺等器官的转移过程。
2. 药物筛选与疗效评估
体外药敏实验:通过 GFP 标记细胞,结合流式细胞术分析药物对细胞活性的影响。
体内药效验证:接种稳转株至动物模型,利用 ffluc 活体成像定量评估药物对肿瘤生长的抑制作用。
3. 基因功能研究
基因表达调控:通过稳转株持续表达目的基因(如癌基因或抑癌基因),结合 GFP 和 ffluc 标记,分析基因对细胞增殖、凋亡或迁移的影响。
培养与维护要点
培养基:通常使用适合 KYSE-150 细胞的培养基(如 RPMI 1640 或 DMEM),添加 10% 胎牛血清(FBS),并根据需要加入嘌呤霉素(Puro)进行筛选压力维持(一般浓度为 1-5 µg/mL,需预实验优化)。
荧光监测:定期通过荧光显微镜观察 GFP 表达强度,确保标记基因稳定表达。
细胞传代:避免过度汇合导致荧光表达异质性,建议传代密度维持在 50%⁻⁷0%。
冻存与复苏:冻存时建议使用含 10% DMSO 的冻存液,复苏后需通过嘌呤霉素筛选去除未稳定整合的细胞。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
热门标签:KYSE-150-GFP-Puro+ffluc稳转株,ffluc,和,GFP,双标的,KYSE-150,稳转株,KYSE-150-GFP-Puro+ffluc,polyclonal,stable,cell,line















