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HeLa-ffluc1-BSD 稳转株
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详细内容
HeLa-ffluc1-BSD 稳转株
产品名称 | HeLa-ffluc1-BSD 稳转细胞株 |
产品货号 | XY-H2200 |
中文名称 | 萤火虫荧光素酶(ffluc)标记的 HeLa 稳转细胞株 |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | (1)构建目的基因过表达慢病毒重组质粒,并包装慢病毒; (2)慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞; (3)用最佳浓度药物对细胞株进行筛选,获得混合稳转细胞株; (4)稳转细胞株质检(COA)。 |
完全培养基 | DMEM-H + 10% FBS |
培养条件 | (1) 气相:95%空气,5% CO2;(2) 温度:37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |

基本定义
来源:是由 HeLa 细胞通过慢病毒系统转化而来。HeLa 细胞是一种源自人类宫颈癌的细胞系,具有无限增殖能力,在细胞生物学研究中被广泛应用。
基因表达:该稳转株表达萤火虫荧光素酶(ffluc1)基因,在荧光素和 ATP 等底物存在的条件下,可发出荧光,便于进行相关的检测和分析。同时,细胞株中还含有 BSD(杀稻瘟菌素)抗性基因,用于在构建过程中进行筛选。
构建过程
载体构建:将包含 ffluc1 基因和 BSD 抗性基因的表达盒插入到慢病毒载体中,构建成重组慢病毒载体。
慢病毒包装:将重组慢病毒载体转染到包装细胞系中,如 293T 细胞,产生具有感染能力的慢病毒颗粒。
细胞感染:用制备好的慢病毒颗粒感染 HeLa 细胞,使慢病毒载体中的目的基因整合到 HeLa 细胞的基因组中。
药物筛选:感染后的细胞在含有杀稻瘟菌素的培养基中进行筛选,只有成功整合了目的基因并表达 BSD 抗性蛋白的细胞才能存活,经过一段时间的筛选和培养,获得稳定表达 ffluc1 基因的 HeLa-ffluc1-BSD 稳转株。
应用领域
基因表达调控研究:可用于研究基因转录、翻译等过程的调控机制,通过观察荧光素酶的表达情况,了解目的基因在不同条件下的表达水平变化。
药物研发:作为药物筛选的细胞模型,用于评估药物对特定基因或信号通路的影响。例如,观察药物处理后稳转株中荧光素酶活性的变化,判断药物是否具有潜在的治疗作用。
细胞生物学研究:在细胞增殖、凋亡、迁移等细胞生物学过程的研究中,作为标记细胞,方便追踪细胞的行为和变化。
培养与维护
培养基:一般使用含有 10% 胎牛血清的 DMEM 培养基,以提供细胞生长所需的营养物质。
培养条件:将细胞置于 37℃、5% CO2 的培养箱中培养,维持适宜的温度和气体环境,以保证细胞的正常生长和代谢。
传代与冻存:当细胞生长至 80%-90% 汇合度时,需要进行传代培养。传代时,先用胰酶消化细胞,然后将细胞接种到新的培养容器中。对于长期保存,可以将细胞冻存于液氮中,以备后续使用。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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