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上海信裕生物科技有限公司 主营产品:ELISA试剂盒价格,检测试剂盒,白介素试剂盒,试剂盒价格,重组蛋白,单克隆抗体,多克隆抗体

第11年

当前位置: 阿仪网 > 生物试剂/抗体/细胞 > 细胞生物学 > 细胞/细胞株 > 上海信裕生物科技有限公司 > 产品展示 > 细胞 > 人细胞株 > U87 MG-Puro+ffluc稳转株

U87 MG-Puro+ffluc稳转株

价格:¥ 电议

品牌名称:$brandModel.Title型号: 原产地:中国大陆 更新时间:2026/10/19 10:48:35

产品摘要:U87 MG-Puro+ffluc稳转株是一种源自人脑胶质母细胞瘤的永生化细胞系,因其恶性程度高、增殖能力强,常用于肿瘤生物学、药物筛选及基因编辑等研究。** 稳转株(Stable Cell Line)** 指通过基因工程手段将外源基因稳定整合到细胞基因组中,使其能长期表达特定蛋白或标记物的细胞株。

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旗舰版网址:http://www.xybio-sh.com

详细内容

U87 MG-Puro+ffluc稳转株

英文名称

U87 MG-Puro+ffluc polyclonal stable cell line

产品货号

XY-H2206

中文名称

ffluc 标记的 U87 MG 稳转株

Lot number

U87 MG-24D3P

细胞规格

复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞

细胞形态

上皮细胞样

生长特性

贴壁生长

细胞株

构建流程

(1)构建目的基因过表达慢病毒重组质粒,并包装慢病毒;

(2)慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞;

(3)用最佳浓度药物对细胞株进行筛选,获得混合稳转株;

(4)稳转株质检(COA)。

完全培养基

DMEM-H + 10% FBS + 1% P/S(选择添加)

培养条件

(1) 气相:95%空气,5% CO2;(2) 温度:37 ℃。

细胞冻存

无血清冻存液

存储条件

液氮

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U87 MG-Puro+ffluc 稳转株概述

U87 MG 细胞是一种源自人脑胶质母细胞瘤的永生化细胞系,因其恶性程度高、增殖能力强,常用于肿瘤生物学、药物筛选及基因编辑等研究。** 稳转株(Stable Cell Line)** 指通过基因工程手段将外源基因稳定整合到细胞基因组中,使其能长期表达特定蛋白或标记物的细胞株。

关键组件解析:

Puro:

即嘌呤霉素(Puromycin),是一种抗生素,常用于稳转株筛选。通过将携带嘌呤霉素抗性基因的质粒转入细胞,未成功整合外源基因的细胞会被嘌呤霉素杀死,存活细胞即为稳定转染的细胞株。

ffluc:

指萤火虫荧光素酶(Firefly Luciferase),是一种报告基因。其表达的荧光素酶可催化荧光素氧化并产生生物荧光,通过活体成像技术(如小动物成像系统)可实时监测细胞在体内的增殖、迁移及肿瘤形成等动态过程,广泛应用于肿瘤研究、药物代谢及基因治疗评估。

构建流程与技术要点

1. 载体构建

设计包含以下元件的重组质粒:

目的基因 / 报告基因(ffluc):编码荧光素酶的 cDNA 序列。

嘌呤霉素抗性基因(PuroR):用于筛选稳转细胞。

启动子(如 CMV):驱动基因持续表达。

复制原点及筛选标记(如氨苄青霉素抗性):便于质粒在细菌中扩增。

2. 细胞转染

通过脂质体转染、电穿孔或病毒介导(如慢病毒、逆转录病毒)等方法将重组质粒导入 U87 MG 细胞。

病毒介导法常用于难转染的细胞,可提高外源基因整合效率,尤其适用于构建稳定表达细胞株。

3. 稳转株筛选与鉴定

药物筛选:转染后 48⁻⁷2 小时加入嘌呤霉素(浓度需预实验优化),持续培养 1-2 周,未成功整合抗性基因的细胞死亡,存活细胞形成单克隆。

鉴定方法:

荧光素酶活性检测:裂解细胞后加入荧光素底物,通过酶标仪检测发光强度,验证 ffluc 表达水平。

Western blot:检测荧光素酶蛋白的表达。

活体成像:将细胞接种至动物模型(如裸鼠),注射荧光素后通过成像系统观察体内荧光信号,确认稳转株在活体中的功能活性。

应用场景

1. 肿瘤生物学研究

体内成瘤模型:将 U87 MG-Puro+ffluc 稳转株接种于免疫缺陷小鼠,通过荧光成像实时追踪肿瘤生长速度、转移灶分布,评估抗肿瘤药物疗效或基因治疗效果。

细胞迁移与侵袭研究:结合 Transwell 实验或斑马鱼模型,利用荧光信号标记细胞,观察其在体外或体内的迁移能力。

2. 药物筛选与药效评估

通过荧光素酶活性变化反映细胞代谢或存活状态,高通量筛选潜在抗肿瘤化合物。例如,药物处理后若荧光信号减弱,提示细胞增殖受抑制或凋亡增加。

3. 基因编辑与功能研究

作为工具细胞株,可进一步进行 CRISPR-Cas9 基因编辑(如敲除抑癌基因或过表达致癌基因),结合 ffluc 标记追踪基因编辑后细胞的生物学行为变化。

仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。

以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。


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