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U373-GFP-Puro+ffluc稳转株
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品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/19 10:48:35
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详细内容
U373-GFP-Puro+ffluc稳转株
英文名称 | U373-GFP-Puro+ffluc polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-H2210 |
中文名称 | ffluc 和 GFP 双标的 U373 稳转株 |
Lot number | U373-24D1P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | （1）构建目的基因过表达慢病毒重组质粒，并包装慢病毒； （2）慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞； （3）用最佳浓度药物对细胞株进行筛选，获得混合稳转株； （4）稳转株质检（COA）。 |
完全培养基 | RPMI-1640 + 10% FBS |
培养条件 | (1) 气相：95%空气，5% CO2；(2) 温度：37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |
一、基本背景
1. 亲本细胞系（U373）
来源：U373 是一种人脑星形胶质细胞瘤细胞系，源自恶性胶质母细胞瘤患者的肿瘤组织，具有贴壁生长特性，常用于神经系统肿瘤研究。
特性：增殖能力较强，可模拟胶质细胞瘤的恶性表型，如侵袭性生长、信号通路异常等。
2. 稳转株的构建
通过慢病毒或质粒载体将外源基因（GFP、Puro 抗性基因、ffluc）稳定整合到 U373 细胞的基因组中，经抗生素（嘌呤霉素，Puro）筛选后获得稳定表达的细胞株。
关键元件：
GFP（绿色荧光蛋白）：用于实时荧光成像，追踪细胞位置、形态及迁移等动态过程。
Puro 抗性基因：赋予细胞对嘌呤霉素的抗性，用于稳转株的筛选和维持。
ffluc（萤火虫荧光素酶）：通过荧光素酶报告基因系统，定量检测细胞数量、增殖或体内成瘤能力（需配合底物荧光素）。
二、核心应用场景
1. 细胞成像与示踪
体外：利用 GFP 荧光直接观察细胞形态、分布及与其他细胞 / 基质的相互作用（如共培养实验）。
体内：通过活体成像技术（如小动物成像系统）追踪肿瘤细胞在动物模型中的转移、定植过程（需 ffluc 配合荧光素底物）。
2. 药物筛选与药效评估
体外模型：通过 GFP 标记观察药物对细胞形态的影响，或通过 ffluc 荧光强度变化定量分析药物对细胞增殖的抑制率。
体内模型：将稳转株接种至免疫缺陷小鼠（如裸鼠），利用 ffluc 检测肿瘤生长动力学，评估候选药物的体内抗肿瘤效果。
3. 基因功能研究
作为工具细胞株，用于验证外源基因（如癌基因、抑癌基因）的过表达或敲低对细胞表型（如侵袭、凋亡）的影响，GFP 和 ffluc 可辅助监测转染效率或细胞存活状态。
4. 肿瘤微环境研究
结合 GFP 的荧光特性，研究肿瘤细胞与免疫细胞、基质细胞的相互作用，或肿瘤血管生成等微环境因素。
三、技术优势与局限性
1. 优势
双标记系统：GFP（直观成像）与 ffluc（定量检测）结合，实现细胞行为的定性观察与定量分析的统一。
稳定性：外源基因整合至基因组，避免瞬时转染的表达波动，适合长期实验（如动物成瘤周期）。
操作便捷性：Puro 抗性便于细胞株的传代维持，减少污染风险。
2. 局限性
背景荧光干扰：GFP 信号可能受细胞自发荧光或实验环境影响，需设置阴性对照（如未标记的 U373 细胞）。
体内成像深度限制：ffluc 的生物发光依赖底物渗透和组织穿透性，深部肿瘤的信号强度可能较低，需优化成像参数或使用近红外荧光标记。
细胞特性改变风险：外源基因整合可能影响亲本细胞的原有生物学特性（如增殖速率、侵袭能力），需通过功能实验验证。
仅用于科研，不能用于临床诊断！所有产品仅供科研使用，不得用于人或动物的治疗等任何其他用途，不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。
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