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BxPC-3-GFP-Puro+ffluc稳转株
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详细内容
BxPC-3-GFP-Puro+ffluc稳转株
产品名称 | BxPC-3-GFP-Puro+ffluc 稳转株 |
产品货号 | XY-H2215 |
中文名称 | ffluc 和 GFP 双标的 BxPC-3 稳转株 |
Lot number | BxPC-3-3B6P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | (1)构建目的基因过表达慢病毒重组质粒,并包装慢病毒; (2)慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞; (3)用最佳浓度药物对细胞株进行筛选,获得混合稳转株; (4)稳转株质检(COA)。 |
完全培养基 | RPMI-1640 + 10% FBS + 1% P/S(选择添加) |
培养条件 | (1) 气相:95%空气,5% CO2;(2) 温度:37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |

构建原理:通过将包含绿色荧光蛋白(GFP)基因、萤火虫荧光素酶(ffluc)基因以及嘌呤霉素(Puro)抗性基因的外源 DNA,克隆到具有相应抗性标记的载体上,再利用慢病毒感染等方式将载体转染到 BxPC-3 细胞中,使外源基因整合到宿主细胞的染色体中。然后使用嘌呤霉素进行筛选,获得能够稳定表达 GFP 和 ffluc 的 BxPC-3 细胞株,即 BxPC-3-GFP-Puro +ffluc 稳转株。
标记基因的作用:
GFP:绿色荧光蛋白可以在荧光显微镜下发出绿色荧光,便于对细胞进行直观的观察和追踪,例如在细胞培养过程中可以实时观察细胞的生长、迁移等行为,也可在动物体内对移植的细胞进行定位和示踪。
ffluc:萤火虫荧光素酶在有底物存在的情况下能够催化发光反应,通过检测荧光素酶的活性,可以定量分析细胞的数量、代谢活性等。常用于体内成像实验,如将稳转株接种到动物模型中,通过检测荧光信号来监测肿瘤的生长、转移以及对治疗的反应等。
Puro 抗性基因:使得细胞具有对嘌呤霉素的抗性,在含有嘌呤霉素的培养基中,只有成功整合了外源基因并表达 Puro 抗性蛋白的细胞才能存活,从而实现对稳转株细胞的筛选和维持。
应用领域:
癌症研究:由于 BxPC-3 细胞是一种人胰腺癌细胞系,该稳转株可用于研究胰腺癌细胞的生物学特性,如细胞增殖、凋亡、侵袭和转移等机制。通过观察 GFP 和检测 ffluc 的表达变化,了解癌细胞在不同条件下的行为改变。
药物研发:可用于筛选和评估针对胰腺癌细胞的新型药物。将不同的药物作用于稳转株细胞,通过观察细胞的生长抑制情况、荧光信号变化等,判断药物的疗效和作用机制,为开发治疗胰腺癌的药物提供实验依据。
体内成像研究:将稳转株接种到动物体内后,利用 GFP 的荧光特性和 ffluc 的生物发光特性,可以在活体动物中实时监测肿瘤的发展过程,以及研究肿瘤细胞与宿主免疫系统之间的相互作用等。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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