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HaCaT-Puro+ffluc稳转株
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品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/19 10:48:35
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详细内容
HaCaT-Puro+ffluc稳转株
英文名称 | HaCaT-Puro+ffluc polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-H2224 |
中文名称 | ffluc 标记的 HaCaT 稳转株 |
Lot number | HaCaT-24D3P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | （1）构建目的基因过表达慢病毒重组质粒，并包装慢病毒； （2）慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞； （3）用最佳浓度药物对细胞株进行筛选，获得混合稳转株； （4）稳转株质检（COA）。 |
完全培养基 | DMEM-H + 10% FBS + 1% P/S（选择添加） |
培养条件 | (1) 气相：95%空气，5% CO2；(2) 温度：37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |
构建过程：通常是利用慢病毒载体将包含嘌呤霉素抗性基因（Puro）和萤火虫荧光素酶基因（ffluc）的外源 DNA 片段导入 HaCaT 细胞中。慢病毒感染细胞后，其基因组可整合到宿主细胞染色体中，使细胞获得稳定表达 Puro 和 ffluc 的能力。通过在培养基中添加嘌呤霉素进行筛选，只有成功整合了外源基因并表达 Puro 的细胞才能存活，从而得到稳定转染的 HaCaT - Puro + ffluc 细胞株。
特点和应用：
抗性筛选标记：嘌呤霉素抗性基因使细胞具有对嘌呤霉素的抗性，在含有嘌呤霉素的培养基中培养时，未成功转染的细胞会被杀死，而稳转株细胞能够存活并持续生长，便于筛选和维持稳定转染的细胞群体。
生物发光报告基因：萤火虫荧光素酶基因 ffluc 的表达产物萤火虫荧光素酶可以催化荧光素底物发生氧化反应，产生生物发光。这种特性使得 HaCaT - Puro + ffluc 稳转株在体外和体内实验中都可作为报告细胞株，用于监测细胞的活动、基因表达、细胞定位以及细胞间相互作用等。例如，在体内实验中，可以通过给动物注射荧光素底物，然后利用生物发光成像技术观察 HaCaT - Puro + ffluc 稳转株在动物体内的分布、生长和转移情况；在体外实验中，可用于研究细胞的增殖、分化、凋亡等过程中相关基因的表达变化。
培养和维护：培养 HaCaT - Puro + ffluc 稳转株时，需要使用适合 HaCaT 细胞生长的培养基，并添加适量的嘌呤霉素以维持对稳转株的筛选压力，确保细胞持续表达 ffluc 和 Puro。同时，要注意培养条件的稳定性，包括温度、湿度、二氧化碳浓度等，以保证细胞的正常生长和稳定表达外源基因。
仅用于科研，不能用于临床诊断！所有产品仅供科研使用，不得用于人或动物的治疗等任何其他用途，不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。
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