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MFC-GFP-Puro+ffluc稳转株
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品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/19 10:48:35
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详细内容
MFC-GFP-Puro+ffluc稳转株
英文名称 | MFC-GFP-Puro+ffluc polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-M1212 |
中文名称 | GFP 和 ffluc 双标的 MFC 稳转株 |
Lot number | MFC-24D1P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | （1）构建目的基因过表达慢病毒重组质粒，并包装慢病毒； （2）慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞； （3）用最佳浓度药物对细胞株进行筛选，获得混合稳转株； （4）稳转株质检（COA）。 |
完全培养基 | RPMI-1640 + 10% FBS |
培养条件 | (1) 气相：95%空气，5% CO2；(2) 温度：37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |
一、核心组件解析
1. MFC 细胞背景
MFC 细胞：通常指小鼠纤维肉瘤细胞（Murine Fibrosarcoma Cell），是一种源自小鼠的恶性肿瘤细胞系，具有较强的增殖和侵袭能力，常用于肿瘤研究模型。
2. GFP（绿色荧光蛋白）
功能：作为报告基因，使细胞表达绿色荧光，便于通过荧光显微镜、流式细胞术等手段实时观察细胞形态、定位及分布，或用于细胞分选（如 FACS）。
应用场景：追踪细胞在体外培养或体内（如动物模型）的动态变化，例如研究肿瘤细胞的迁移、侵袭过程。
3. Puro（嘌呤霉素抗性基因）
功能：提供对嘌呤霉素（Puromycin）的抗性，用于稳转株的筛选和维持。
原理：在构建稳转株时，质粒载体携带 Puro 抗性基因，未成功整合目的基因的细胞会被嘌呤霉素杀死，存活细胞即为稳定表达目标基因（如 GFP、ffluc）的稳转株。
4. ffluc（萤火虫荧光素酶）
功能：作为生物发光报告基因，催化荧光素底物发光，可通过活体成像系统（如 IVIS）检测，用于定量分析细胞数量、分布及代谢活动。
优势：无需外部光源，发光信号穿透力强，适用于动物体内实时监测（如肿瘤生长、转移的非侵入性追踪）。
二、稳转株构建流程
载体构建：
将 GFP、Puro 抗性基因和 ffluc 基因插入同一质粒载体，形成多顺反子表达载体（如使用 IRES 元件实现共表达）。
细胞转染：
通过脂质体转染、电穿孔等方法将载体导入 MFC 细胞。
筛选与鉴定：
加入嘌呤霉素筛选存活细胞，获得稳定整合载体的单克隆细胞株。
通过荧光显微镜检测 GFP 表达，通过 luciferase 活性检测（如荧光素酶报告基因检测试剂盒）验证 ffluc 功能。
扩增与冻存：
扩大培养阳性克隆，冻存备用，确保细胞株的稳定性和可重复性。
三、主要应用场景
1. 体外研究
细胞示踪与功能分析：
利用 GFP 观察细胞形态、细胞间相互作用或亚细胞定位（如标记细胞器）。
通过 ffluc 定量检测细胞增殖、药物敏感性（如化疗药物对肿瘤细胞的杀伤效果）。
细胞分选与纯化：
通过流式细胞术（FACS）基于 GFP 荧光强度分选高表达细胞，获得均一性更好的稳转株。
2. 体内研究（动物模型）
肿瘤生物学研究：
接种 MFC-GFP-Puro+ffluc 细胞至小鼠体内，通过活体荧光成像（GFP）和生物发光成像（ffluc）追踪肿瘤生长、转移及药物治疗效果。
例：监测肿瘤体积变化、转移灶分布，或评估免疫治疗（如 CAR-T 细胞）对肿瘤的清除效率。
药代动力学与药效评估：
ffluc 的定量信号可反映药物在体内的分布和代谢，辅助优化给药方案。
3. 基因功能研究
作为工具细胞株，用于研究特定基因（如与肿瘤侵袭相关的基因）的功能，通过 GFP 和 ffluc 信号变化评估基因调控效果。
仅用于科研，不能用于临床诊断！所有产品仅供科研使用，不得用于人或动物的治疗等任何其他用途，不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。
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