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CNE-Puro+ffluc稳转株
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详细内容
CNE-Puro+ffluc稳转株
英文名称 | CNE-Puro+ffluc polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-H2279 |
中文名称 | ffluc 标记的 CNE 稳转株 |
Lot number | CNE-24D3P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | (1)构建目的基因过表达慢病毒重组质粒,并包装慢病毒; (2)慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞; (3)用最佳浓度药物对细胞株进行筛选,获得混合稳转株; (4)稳转株质检(COA)。 |
完全培养基 | RPMI-1640 + 10% FBS + 1% P/S(选择添加) |
培养条件 | (1) 气相:95%空气,5% CO2;(2) 温度:37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |

细胞背景:CNE 通常指的是一种鼻咽癌细胞系。以 CNE 细胞系为基础构建稳转株,能够利用该细胞系的特性,例如其具有癌细胞的增殖能力、特定的基因表达模式等,可用于癌症相关的研究,如肿瘤发生机制、药物筛选等领域。
抗性筛选标记:Puro 即嘌呤霉素(puromycin),是一种常用的真核表达载体抗性筛选标志物。在构建稳转株的过程中,带有 Puro 抗性基因的载体被转染至 CNE 细胞中。只有那些成功整合了外源 DNA(包含目的基因和 Puro 抗性基因)的细胞,才能在含有嘌呤霉素的培养基中存活并增殖,从而实现对稳定转染细胞的筛选。
报告基因:ffluc 一般指萤火虫荧光素酶(Firefly luciferase)。它是一种常用的报告基因,ffluc 基因被整合到 CNE 细胞的基因组中,能够稳定表达萤火虫荧光素酶。该酶以荧光素(luciferin)为底物,在 Mg²⁺、ATP 和氧分子存在的条件下,催化荧光素氧化成氧化荧光素,在此过程中会发出最强波长在 560nm 左右的生物荧光。通过检测荧光信号的有无及强弱,可以直观地反映出目的基因的表达情况,或用于监测细胞的活动、基因的转录调控等。例如,在研究基因功能时,若目的基因与 ffluc 基因在同一表达框架下,那么观察到的荧光强度变化就可以间接反映目的基因的表达水平变化;在药物研发中,可利用该稳转株来评估药物对特定基因表达或细胞功能的影响,通过检测荧光信号来判断药物的作用效果。
这种稳转株的构建通常是通过慢病毒感染等方法将包含 Puro 抗性基因和 ffluc 基因的外源 DNA 整合到 CNE 细胞的基因组中。慢病毒具有能够感染多种类型细胞、可将遗传物质高效整合到宿主细胞基因组中并进行长时间稳定表达等优点,是构建稳转株的常用载体。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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