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MGC-803-Puro+ffluc稳转株
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详细内容
MGC-803-Puro+ffluc稳转株
英文名称 | MGC-803-Puro+ffluc polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-H2270 |
中文名称 | ffluc 标记的 MGC-803 稳转株 |
Lot number | MGC-803-24D3P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | (1)构建目的基因过表达慢病毒重组质粒,并包装慢病毒; (2)慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞; (3)用最佳浓度药物对细胞株进行筛选,获得混合稳转株; (4)稳转株质检(COA)。 |
完全培养基 | DMEM-H + 10% FBS + 1% P/S(选择添加) |
培养条件 | (1) 气相:95%空气,5% CO2;(2) 温度:37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |

1. 基本概念
MGC-803 细胞:人胃癌细胞系,常用于胃癌相关研究(如肿瘤细胞增殖、侵袭机制、药物敏感性等)。
稳转株(稳定转染细胞株):通过基因工程技术将外源基因(如荧光蛋白、抗性基因等)稳定整合到细胞基因组中,使细胞可长期表达目标基因的细胞群体。
Puro+ffluc:
Puro:嘌呤霉素(Puromycin)抗性基因,用于筛选成功转染的细胞(含该基因的细胞可在嘌呤霉素培养基中存活)。
ffluc:萤火虫荧光素酶(Firefly Luciferase)基因,常用于报告基因检测,可通过荧光成像追踪细胞在体内外的分布、增殖等动态变化。
2. 构建流程
通常包括以下步骤:
载体构建:将 Puro 抗性基因和 ffluc 基因插入到合适的载体(如慢病毒载体、质粒载体)中,形成重组表达载体。
转染 / 感染:通过脂质体转染、电穿孔或病毒感染(如慢病毒)将重组载体导入 MGC-803 细胞。
筛选与鉴定:
使用嘌呤霉素培养基筛选存活细胞(未成功转染的细胞死亡)。
通过荧光显微镜观察 ffluc 表达(荧光信号)、Western blot 检测荧光素酶蛋白,或通过荧光素酶活性测定(如 Luciferase Assay)验证基因表达。
单克隆化:通过有限稀释法或流式细胞术筛选单克隆细胞,确保稳转株的遗传稳定性和均一性。
3. 应用场景
肿瘤研究:
体内成像:将稳转株注射到动物模型(如裸鼠)中,通过活体荧光成像技术(IVIS)实时监测肿瘤生长、转移及药物治疗效果。
机制研究:结合 ffluc 报告基因,分析基因调控通路(如启动子活性、信号通路响应)。
药物筛选:利用嘌呤霉素抗性筛选系统,快速评估药物对稳转株的增殖抑制或凋亡诱导作用。
细胞示踪:ffluc 荧光信号可追踪细胞在体外共培养体系或体内微环境中的迁移和定植。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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