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CTLL-2-Puro+ffluc稳转株
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品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/22 8:33:24
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详细内容
CTLL-2-Puro+ffluc稳转株
英文名称 | CTLL-2-Puro+ffluc polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-M1239 |
中文名称 | ffluc 标记的 CTLL-2 稳转株 |
Lot number | CTLL-2-24D3P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 淋巴母细胞样 |
生长特性 | 悬浮生长 |
细胞株 构建流程 | （1）构建目的基因过表达慢病毒重组质粒，并包装慢病毒； （2）慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞； （3）用最佳浓度药物对细胞株进行筛选，获得混合稳转株； （4）稳转株质检（COA）。 |
完全培养基 | RPMI-1640 + 10% FBS + IL-2+ 1% P/S（选择添加） |
培养条件 | (1) 气相：95%空气，5% CO2；(2) 温度：37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |
CTLL-2-Puro+ffluc 稳转株概述
CTLL-2 细胞是一种源自小鼠的 T 淋巴细胞系，依赖白细胞介素 - 2（IL-2）存活，常用于免疫学、细胞信号传导等研究。稳转株（稳定转染细胞株）是通过基因工程手段将外源基因稳定整合到细胞基因组中，使其能长期表达特定蛋白或标记的细胞群体。
CTLL-2-Puro+ffluc 的关键特性：
抗性标记（Puro）：
携带嘌呤霉素（Puromycin）抗性基因（Puro），可通过嘌呤霉素筛选获得稳定转染的细胞株，排除未成功整合外源基因的细胞。
应用：确保实验中使用的细胞均为成功导入目标基因的单克隆或多克隆群体，避免因基因表达不稳定导致的实验误差。
荧光素酶标记（ffluc）：
整合了萤火虫荧光素酶（Firefly Luciferase, ffluc）基因，可通过荧光素酶报告基因系统进行检测：
原理：荧光素酶在 ATP、镁离子和氧气存在下，催化荧光素氧化并释放生物荧光，可通过酶标仪或活体成像系统定量检测。
应用：
细胞增殖 / 存活分析（如 IL-2 依赖性生长实验）。
体内肿瘤模型构建（如小鼠皮下或静脉注射后，通过活体成像追踪细胞分布和生长）。
药物筛选（评估化合物对细胞活性的影响）。
构建流程（示例）：
载体设计：
构建含目的基因（如 ffluc）、Puro 抗性基因的表达载体（如质粒），通常使用 CMV、EF1α 等强启动子驱动基因表达。
转染：
通过电穿孔、脂质体转染等方法将载体导入 CTLL-2 细胞。
筛选与克隆化：
加入嘌呤霉素（浓度需预实验优化，通常为 0.5–2 µg/mL）培养 2–3 周，杀死未整合载体的细胞。
有限稀释法或单细胞分选获得单克隆稳转株，通过荧光素酶活性检测验证 ffluc 表达水平。
鉴定与冻存：
验证指标：荧光素酶活性（如发光强度）、Puro 抗性、细胞形态及生长特性（如 IL-2 依赖性是否保留）。
冻存：筛选后的稳转株需液氮保存，避免长期培养导致基因丢失。
仅用于科研，不能用于临床诊断！所有产品仅供科研使用，不得用于人或动物的治疗等任何其他用途，不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。
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