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NCI-H358-Puro+ffluc稳转株
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详细内容
NCI-H358-Puro+ffluc稳转株
英文名称 | NCI-H358-Puro+ffluc polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-H2300 |
中文名称 | ffluc 标记的 NCI-H358 稳转株 |
Lot number | NCI-H358-24D3P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | (1)构建目的基因过表达慢病毒重组质粒,并包装慢病毒; (2)慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞; (3)用最佳浓度药物对细胞株进行筛选,获得混合稳转株; (4)稳转株质检(COA)。 |
完全培养基 | RPMI-1640 + 10% FBS + 1% P/S(选择添加) |
培养条件 | (1) 气相:95%空气,5% CO2;(2) 温度:37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |

NCI - H358 细胞背景:1981 年从一位尚未开始化疗的患者的肿瘤组织中分离建株,来源于肺部的细支气管及肺泡癌。超微结构研究显示其细胞质中有 Clara 细胞的特征结构,表达主要的肺表面结合蛋白 SP - A 的蛋白和 RNA,不表达 SP - B 和 SP - C,在软琼脂中的克隆形成效率为 0.83%。
稳转株构建原理:通过慢病毒感染等方式将携带目的基因(如 ffluc)和筛选标记基因(如 Puro,嘌呤霉素抗性基因)的载体导入 NCI - H358 细胞,使目的基因整合到细胞基因组中。利用嘌呤霉素对细胞进行筛选,只有成功整合了载体的细胞才能在含有嘌呤霉素的培养基中存活并稳定表达目的蛋白,从而得到 NCI - H358 - Puro + ffluc 稳转株。
Puro(嘌呤霉素)的作用:是一种抗生素,在稳转株构建过程中作为筛选标记。只有转入了携带 Puro 抗性基因载体的细胞,才能抵抗嘌呤霉素的杀伤作用,在含有嘌呤霉素的培养基中生长,从而实现对稳定转染细胞的筛选。
ffluc(萤火虫荧光素酶)的作用:ffluc 基因常被用作报告基因。它编码的萤火虫荧光素酶可以催化荧光素底物发生氧化反应,产生生物发光。在细胞实验中,可通过检测荧光素酶的活性来反映目的基因的表达情况,或用于监测细胞的生理活动、信号通路的激活状态等。例如,在研究基因调控、药物作用机制等方面,若目的基因与 ffluc 基因融合表达,那么观察荧光强度就能了解目的基因的表达水平变化。
这种稳转株可用于多种研究,如在肿瘤生物学研究中,借助 ffluc 的报告作用,研究 NCI - H358 细胞在体内外的生长、增殖、侵袭和转移等特性;在药物研发中,用于评估药物对 NCI - H358 细胞的作用效果,以及筛选针对该细胞的潜在治疗药物等。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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