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A-204-Puro+ffluc稳转株
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详细内容
A-204-Puro+ffluc稳转株
英文名称 | A-204-Puro+ffluc polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-H2327 |
中文名称 | ffluc 标记的 A-204 稳转株 |
Lot number | A-204-24D3P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | (1)构建目的基因过表达慢病毒重组质粒,并包装慢病毒; (2)慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞; (3)用最佳浓度药物对细胞株进行筛选,获得混合稳转株; (4)稳转株质检(COA)。 |
完全培养基 | McCoy’s 5A Media + 10% FBS + 1% P/S(选择添加) |
培养条件 | (1) 气相:95%空气,5% CO2;(2) 温度:37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |

细胞背景
A-204 细胞:A-204 细胞系源自一位患有横纹肌肉瘤的 1 岁女孩的肌肉组织,由 D.J. Giard 建立,形态特性为上皮细胞样,生长特性为贴壁生长。
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相关标记与抗性
Puro:即嘌呤霉素(puromycin),是一种抗生素。在细胞培养中,Puro 被用于筛选转染成功的细胞。带有 Puro 抗性基因的载体转染到细胞后,只有成功整合了该载体的细胞才能在含有 Puro 的培养基中存活,从而实现对稳转株的筛选。
ffluc:通常指萤火虫荧光素酶(firefly luciferase)基因。将 ffluc 基因导入 A-204 细胞构建成稳转株后,细胞能够稳定表达萤火虫荧光素酶。该酶可以催化荧光素底物发生氧化反应,产生生物荧光,从而可用于细胞成像、基因表达定量分析、药物筛选等实验,便于对细胞的行为和基因表达情况进行监测。
构建方法
慢病毒转染法:将含有目的基因(如 ffluc 基因)和 Puro 抗性基因的慢病毒载体转染 A-204 细胞。慢病毒可以将其携带的基因整合到宿主细胞的染色体中,使目的基因能够稳定表达。转染后,使用含有 Puro 的培养基进行筛选,只有成功整合了慢病毒载体的细胞才能存活并形成稳转株。
转座子系统法:利用转座子系统进行细胞稳转株的构建,其载体中包括转座子的识别区域,在转座酶的催化下,将目的片段(包含 ffluc 基因等)从载体上切割下来,并在基因组里面的固定序列位置进行插入,实现稳转,同样通过 Puro 抗性进行筛选。
应用领域
肿瘤研究:由于 A-204 细胞是横纹肌肉瘤细胞,A-204-Puro+ffluc 稳转株可用于研究横纹肌肉瘤的发生、发展机制,以及肿瘤细胞的增殖、侵袭、转移等生物学行为。通过检测荧光素酶的活性和荧光信号,可实时监测肿瘤细胞在体内外的生长、分布和变化情况。
药物研发:可用于筛选针对横纹肌肉瘤的潜在治疗药物,评估药物对肿瘤细胞的抑制效果和作用机制。利用荧光素酶报告基因系统,可以快速、灵敏地检测药物对肿瘤细胞内特定信号通路或基因表达的影响,为药物研发提供重要的实验依据。
基因功能研究:通过在 A-204 细胞中稳定表达 ffluc 基因或干扰特定基因的表达,结合荧光素酶活性检测,研究相关基因在肿瘤细胞中的功能和调控机制,例如研究某些基因对肿瘤细胞代谢、凋亡、周期等方面的影响。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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