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A-431-Puro+ffluc稳转株
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品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/19 10:48:35
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详细内容
A-431-Puro+ffluc稳转株
英文名称 | A-431-Puro+ffluc polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-H2353 |
中文名称 | ffluc 标记的 A-431 稳转株 |
Lot number | A-431-24D3P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | （1）构建目的基因过表达慢病毒重组质粒，并包装慢病毒； （2）慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞； （3）用最佳浓度药物对细胞株进行筛选，获得混合稳转株； （4）稳转株质检（COA）。 |
完全培养基 | DMEM-H + 10% FBS + 1% P/S（选择添加） |
培养条件 | (1) 气相：95%空气，5% CO2；(2) 温度：37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |
细胞来源：A-431 细胞系源自一位 85 岁女性的表皮样癌组织，是由 D.J. Giard 等人从实体肿瘤中建立的，具有上皮形态，在癌症、毒理学和免疫肿瘤学研究中应用广泛。
构建方法
选择载体：挑选带有 ffluc 基因和 Puro 抗性基因的载体，如慢病毒载体，其能高效将目的基因导入细胞并整合到基因组中，实现长时间稳定表达。
细胞转染：通过脂质体转染或病毒转染等方法将重组载体导入 A-431 细胞。以慢病毒转染为例，需先确定目标细胞系的培养条件、增值速度、支原体污染情况等信息，再进行预实验确定感染复数（MOI）值和筛选药物用量。
药物筛选：转染后，使用嘌呤霉素对细胞进行筛选，只有成功整合了外源基因并表达 Puro 抗性蛋白的细胞才能在含嘌呤霉素的培养基中存活，从而得到稳定表达 ffluc 的 A-431-Puro+ffluc 稳转株。
特点
稳定表达：可持续稳定地表达荧光素酶，能为长期实验提供稳定的荧光信号，避免了瞬时转染导致的表达时间短、信号不稳定的问题，方便对细胞的生理过程、基因功能等进行长期监测和研究。
敏感性和准确性高：荧光素酶的表达具有较高的特异性和敏感性，能够产生较强的荧光信号，且信号强度可准确量化，有利于精确地分析实验结果，例如在活体动物成像实验中，可以清晰地观察到细胞在体内的分布、增殖和迁移等情况。
便于筛选和维持：由于具有嘌呤霉素抗性，在细胞培养过程中可通过添加嘌呤霉素进行筛选和维持，确保稳转株细胞的纯度和稳定性，只有携带抗性基因的稳转株细胞才能在含有嘌呤霉素的培养基中生长。
应用
肿瘤学研究：A-431 细胞具有肿瘤形成能力，A-431-Puro+ffluc 稳转株可用于构建异种移植癌症模型，研究肿瘤生长动力学、肿瘤细胞的侵袭和转移机制等，也可用于评估新的癌症治疗方法的疗效，如观察抗癌药物对肿瘤细胞生长的抑制作用、对肿瘤细胞凋亡的诱导作用等。
药物研发：可作为药物筛选的工具，通过检测荧光素酶活性的变化来评估药物对细胞内特定信号通路的影响，筛选出具有潜在治疗价值的药物分子，还可用于研究药物的药代动力学和药物毒性等。
细胞生物学研究：用于研究细胞的增殖、分化、凋亡等基本生物学过程，借助荧光素酶的报告基因功能，分析相关基因的表达调控机制、信号传导途径等，例如研究表皮生长因子受体（EGFR）信号传导通路在 A-431 细胞中的作用机制，以及该通路对细胞生长、存活和迁移的影响。
仅用于科研，不能用于临床诊断！所有产品仅供科研使用，不得用于人或动物的治疗等任何其他用途，不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。
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