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A375-Puro+ffluc稳转株
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详细内容
A375-Puro+ffluc稳转株
英文名称 | A375-Puro+ffluc polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-H2350 |
中文名称 | ffluc 标记的 A375 稳转株 |
Lot number | A375-24D3P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | (1)构建目的基因过表达慢病毒重组质粒,并包装慢病毒; (2)慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞; (3)用最佳浓度药物对细胞株进行筛选,获得混合稳转株; (4)稳转株质检(COA)。 |
完全培养基 | DMEM-H + 10% FBS + 1% P/S(选择添加) |
培养条件 | (1) 气相:95%空气,5% CO2;(2) 温度:37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |

细胞基础信息:A375 细胞源自患有恶性黑色素瘤的女性患者的皮肤,是由 D・J・Giard 等人建立的,具有贴壁生长的特性,培养条件通常为 DMEM 培养基添加 10% 胎牛血清和 1% 双抗,在抗胸腺细胞球蛋白、血清处理的 NIH 瑞士小鼠中可形成类似于恶性黑素瘤的快速增长的皮下肿瘤,常被用于 3D 细胞培养、高通量筛选、毒理学和免疫肿瘤学研究等。
构建过程:通常是通过慢病毒感染的方式将携带 ffluc 基因和 puro 抗性基因的载体导入 A375 细胞中。ffluc 基因可编码萤火虫荧光素酶,而 puro 抗性基因使细胞具有对嘌呤霉素的抗性。慢病毒载体将这些基因随机整合到 A375 细胞的基因组中,然后利用嘌呤霉素进行筛选,只有成功整合了目的基因并稳定表达的细胞才能在含有嘌呤霉素的培养基中存活,最终得到 A375 - Puro + ffluc 稳转株。
应用领域:在肿瘤研究中,可将该稳转株接种到动物模型中,利用萤火虫荧光素酶的特性,通过非侵入性的生物发光成像技术,实时监测肿瘤细胞在体内的生长、转移和对治疗的反应等。在药物研发中,可以用于高通量筛选抗肿瘤药物,通过观察药物对稳转株细胞生长、增殖、凋亡等指标的影响,评估药物的疗效。还可以在细胞生物学研究中,作为模型细胞来研究黑色素瘤细胞的生物学特性,如细胞增殖、侵袭、迁移等过程中相关基因和信号通路的作用机制。
培养要点:除了满足 A375 细胞的常规培养条件外,由于该稳转株具有嘌呤霉素抗性,在培养过程中通常需要在培养基中添加适量的嘌呤霉素(如 0.5 - 1.0 µg/ml)来维持抗性筛选压力,以确保稳转株细胞中目的基因的稳定表达。同时,要注意细胞的传代次数,避免因过度传代导致细胞特性发生改变或目的基因表达水平下降。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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