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上海信裕生物科技有限公司 主营产品:ELISA试剂盒价格,检测试剂盒,白介素试剂盒,试剂盒价格,重组蛋白,单克隆抗体,多克隆抗体

第11年

当前位置: 阿仪网 > 生物试剂/抗体/细胞 > 细胞生物学 > 细胞/细胞株 > 上海信裕生物科技有限公司 > 产品展示 > 细胞 > 小鼠细胞株 > TM3-BSD+ffluc稳转株

TM3-BSD+ffluc稳转株

价格:¥ 电议

品牌名称:$brandModel.Title型号: 原产地:中国大陆 更新时间:2026/10/19 10:48:21

产品摘要:TM3-BSD+ffluc稳转株来源于小鼠睾丸间质细胞(Leydig cells),常用于内分泌研究、激素合成机制及细胞信号传导等领域。该细胞具有分泌睾酮的能力,是生殖生物学研究的常用模型。

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旗舰版网址:http://www.xybio-sh.com

详细内容

TM3-BSD+ffluc稳转株

产品名称

TM3-ffluc2-BSD 稳转细胞株

产品货号

XY-M1250

中文名称

ffluc2 标记的 TM3 稳转细胞株

细胞规格

复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞

细胞形态

上皮细胞样

生长特性

贴壁生长

细胞株

构建流程

(1)构建目的基因过表达慢病毒重组质粒,并包装慢病毒;

(2)慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞;

(3)用最佳浓度药物对细胞株进行筛选,获得混合稳转细胞株;

(4)稳转细胞株质检(COA)。

完全培养基

DMEM / F12 (1 : 1) + 5% HS + 2.5% FBS

培养条件

(1) 气相:95%空气,5% CO2;(2) 温度:37 ℃。

细胞冻存

无血清冻存液

存储条件

液氮

共享方式

公益性共享


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一、基本概念

1. 核心组件解析

TM3 细胞:

来源于小鼠睾丸间质细胞(Leydig cells),常用于内分泌研究、激素合成机制及细胞信号传导等领域。该细胞具有分泌睾酮的能力,是生殖生物学研究的常用模型。

BSD(Blasticidin):

一种抗生素,用于真核细胞的筛选。稳转株构建中,BSD 抗性基因(如 BSD 基因)常作为筛选标记,使成功转染的细胞在含 BSD 的培养基中存活,未转染细胞被淘汰。

ffluc(Firefly Luciferase):

萤火虫荧光素酶,是一种报告基因。其表达产物可催化荧光素氧化并产生生物荧光,通过荧光成像技术(如活体成像)定量检测细胞数量、分布及基因表达水平,常用于体内外追踪、药物代谢研究或基因调控分析。

2. 稳转株定义

通过基因工程手段将 BSD 抗性基因 和 ffluc 报告基因 稳定整合到 TM3 细胞基因组中,使细胞获得 BSD 抗性 和 荧光素酶表达能力 的细胞株。该细胞株可长期稳定传代,适用于需要持续检测或筛选的实验。

二、构建流程(示意)

载体构建

设计含 BSD 抗性基因 和 ffluc 基因 的重组质粒(如慢病毒载体、逆转录病毒载体或质粒载体),通常需包含启动子(如 CMV)驱动基因表达。

示例载体结构:

plaintext

[启动子(CMV)] → [ffluc基因] → [BSD抗性基因] → [终止子]

细胞转染 / 感染

转染:通过脂质体转染、电穿孔等方法将重组质粒导入 TM3 细胞。

病毒感染:若使用慢病毒 / 逆转录病毒载体,需先包装病毒颗粒,再感染 TM3 细胞(适用于难转染细胞)。

BSD 筛选

转染 / 感染后,用含 BSD 的培养基(如 10-20 µg/mL)培养细胞,未成功整合质粒的细胞死亡,存活细胞形成单克隆(克隆化培养)。

ffluc 表达验证

通过 荧光素酶活性检测(如 Luciferase Assay 试剂盒)或 活体成像,筛选高表达 ffluc 的单克隆细胞株,确保荧光信号强度满足实验需求。

稳定性验证

传代培养稳转株(如 10 代以上),定期检测 BSD 抗性和 ffluc 表达,确认基因整合的稳定性。

三、应用场景

体内外细胞追踪

体外:通过荧光素酶活性定量检测细胞增殖、凋亡或药物处理后的存活情况(如 MTT 替代法)。

体内:将稳转株接种至小鼠体内,利用活体成像系统观察肿瘤生长、转移或药物分布(需配合生物发光成像技术)。

基因调控研究

将 ffluc 基因与目标基因的启动子连接,通过荧光强度变化反映目标基因的转录活性,研究信号通路、转录因子或药物对基因表达的调控。

药物筛选与毒性评估

利用 BSD 抗性筛选稳定表达特定靶点的 TM3 细胞,用于高通量药物筛选;通过 ffluc 信号变化评估药物对细胞功能的影响(如激素分泌与荧光信号的关联性)。

内分泌机制研究

结合 TM3 细胞的睾酮分泌特性,分析激素合成通路中基因表达与荧光信号的关联,探索内分泌疾病的分子机制。

仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。

以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。


热门标签:TM3-BSD+ffluc稳转株,ffluc2,标记的,TM3,稳转细胞株,,TM3,稳转细胞株

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