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RM-1-BSD+ffluc稳转株
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详细内容
RM-1-BSD+ffluc稳转株
产品名称 | RM-1-BSD+ffluc 稳转株 |
产品货号 | XY-M1267 |
中文名称 | ffluc 标记的 RM-1 稳转株 |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 成纤维细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | (1)构建目的基因过表达慢病毒重组质粒,并包装慢病毒; (2)慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞; (3)用最佳浓度药物对细胞株进行筛选,获得混合稳转株; (4)稳转株质检(COA)。 |
完全培养基 | RPMI-1640 + 10% FBS + 1% P/S(选择添加) |
培养条件 | (1) 气相:95%空气,5% CO2;(2) 温度:37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |

RM-1 细胞背景:RM-1 细胞是小鼠前列腺癌细胞,是用重组逆转录病毒 Zipras/myc9(v-Ha-Ras 和 v-Myc)感染 C57BL/6 小鼠 17 天胚胎的泌尿生殖窦细胞,并移植到同基因成年雄性小鼠的肾包膜下获得的细胞株。其细胞形态为上皮细胞样,属于贴壁生长的肿瘤细胞,培养条件为 1640+10% FBS+1% P/S。
BSD 的作用:BSD 即杀稻瘟菌素脱氨基酶基因,在这里作为抗性筛选标记。携带 BSD 抗性基因的细胞可编码杀稻瘟菌素脱氨基酶,使细胞在含杀稻瘟菌素 S 的培养基中能够存活,而未转染 BSD 基因的细胞则会被杀死,从而实现对转染细胞的筛选。
ffluc 的作用:ffluc 是萤火虫荧光素酶基因,它编码的萤火虫荧光素酶可以催化荧光素氧化成氧化荧光素,在这个过程中会发出生物荧光。通过荧光测定仪可测定荧光素氧化过程中释放的生物荧光,常应用于 miRNA 靶基因验证及启动子转录活性调控等方向研究。在 RM-1-BSD+ffluc 稳转株中,ffluc 基因通常是被稳定整合到 RM-1 细胞的基因组中,使得细胞能够持续表达萤火虫荧光素酶,便于对细胞进行相关的检测和研究,比如在体内或体外通过检测荧光来追踪细胞的位置、观察细胞的活动等。
稳转株的构建:一般是将包含 BSD 抗性基因和 ffluc 基因的表达载体,通过特定的转染方法(如慢病毒转染、电转染等)导入 RM-1 细胞中。然后利用杀稻瘟菌素 S 对细胞进行筛选,只有成功转染了目的基因并且能够稳定表达的细胞才能在筛选压力下存活并形成稳定的细胞株,即 RM-1-BSD+ffluc 稳转株。
应用领域:该稳转株可用于肿瘤学研究,例如在构建小鼠前列腺癌模型中,通过将 RM-1-BSD+ffluc 稳转株接种到小鼠体内,利用 ffluc 的荧光特性,能够实时监测肿瘤细胞在小鼠体内的生长、转移和侵袭情况。还可用于药物研发,研究人员可以利用该细胞株来筛选和评估针对前列腺癌细胞的潜在药物,通过观察药物处理后细胞的荧光变化,了解药物对细胞生长、增殖和凋亡等方面的影响。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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