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GL261-GFP-Puro+ffluc稳转株
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详细内容
GL261-GFP-Puro+ffluc稳转株
英文名称 | GL261-GFP-Puro+ffluc polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-M1272 |
中文名称 | ffluc 和 GFP 双标的 GL261 稳转株 |
Lot number | GL261-24D1P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 成纤维细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | (1)构建目的基因过表达慢病毒重组质粒,并包装慢病毒; (2)慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞; (3)用最佳浓度药物对细胞株进行筛选,获得混合稳转株; (4)稳转株质检(COA)。 |
完全培养基 | DMEM-H + 10% FBS + 1% P/S(选择添加) |
培养条件 | (1) 气相:95%空气,5% CO2;(2) 温度:37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |

背景细胞:GL261 细胞是 1939 年通过将 3 - 甲基胆蒽颅内注射到 C57BL/6 小鼠中诱导产生的大脑胶质瘤细胞,属于小鼠胶质瘤细胞系,具有贴壁生长的特性,形态上呈成纤维细胞样,培养时常用 DMEM(含 HEPES)加上 10% FBS、1% GlutaMAX 和 1% PS 作为培养基。
构建方式:通常是利用慢病毒转染的方法,将包含绿色荧光蛋白(GFP)基因、嘌呤霉素抗性基因(Puro)以及萤火虫荧光素酶基因(ffluc)的载体导入 GL261 细胞中。然后通过嘌呤霉素进行筛选,获得能够稳定表达 GFP 和 ffluc 的细胞株,即 GL261 - GFP - Puro + ffluc 稳转株。
标记基因作用:
GFP:是一种常用的报告基因,在紫外或蓝光激发下能发出绿色荧光,且不易淬灭。可用于观察细胞的位置、形态以及细胞内蛋白质的定位和转运等,还适用于流式细胞术、荧光成像等实验,便于对细胞进行实时监测和分析。
ffluc:萤火虫荧光素酶在有底物荧光素存在的条件下,能够催化荧光素发光。通过检测荧光素酶的活性,可以对细胞进行定量分析,常用于体内生物发光检测,如在小动物模型中监测肿瘤细胞的生长、转移以及对治疗的反应等。
Puro:嘌呤霉素抗性基因作为筛选标记,使成功转染的细胞能够在含有嘌呤霉素的培养基中存活,而未转染或未稳定整合目的基因的细胞则会被嘌呤霉素杀死,从而实现对稳转株的筛选。
应用领域:
肿瘤研究:可将其接种到小鼠体内,建立肿瘤模型,利用 GFP 和 ffluc 的标记特性,在活体动物中实时观察肿瘤的发生、发展、转移以及对药物治疗的反应,为肿瘤生物学研究和药物研发提供重要的工具。
细胞生物学研究:由于能够稳定表达 GFP,可用于研究细胞的增殖、分化、凋亡等过程中相关蛋白的表达和定位变化,有助于深入了解细胞的生物学行为和分子机制。
药物筛选:利用该稳转株可以在细胞水平和动物水平上进行药物筛选,通过观察药物对细胞生长、荧光表达等指标的影响,快速筛选出具有潜在抗肿瘤活性的药物。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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