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TPC-1-BSD+ffluc稳转株
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详细内容
TPC-1-BSD+ffluc稳转株
产品名称 | TPC-1-BSD+ffluc 稳转株 |
产品货号 | XY-H2539 |
中文名称 | ffluc 标记的 TPC-1 稳转株 |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | (1)构建目的基因过表达慢病毒重组质粒,并包装慢病毒; (2)慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞; (3)用最佳浓度药物对细胞株进行筛选,获得混合稳转株; (4)稳转株质检(COA)。 |
完全培养基 | RPMI-1640 + 10% FBS + 1% P/S(选择添加) |
培养条件 | (1) 气相:95%空气,5% CO2;(2) 温度:37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |

1. 细胞背景与构建方法
细胞来源:TPC-1 细胞源自人甲状腺乳头状癌患者的肿瘤组织,具有上皮样形态,贴壁生长。
基因整合:通过逆转录病毒载体将 ffluc 基因和 BSD 抗性基因(bsd)整合到 TPC-1 细胞的基因组中。
筛选过程:使用杀稻瘟菌素(Blasticidin)进行药物筛选,浓度通常为 3 µg/ml,持续约 10 天,直至获得稳定表达 ffluc 的细胞克隆。
2. 核心特性与功能
荧光示踪能力:ffluc 基因编码的萤火虫荧光素酶可催化底物 D - 荧光素产生生物发光(波长约 560 nm),适用于活体成像、细胞增殖监测及药物敏感性评估。
稳定遗传表达:外源基因整合至染色体后,可在细胞分裂过程中稳定传递,长期维持荧光信号表达。
生物学特性保留:与亲代 TPC-1 细胞相比,该稳转株的增殖、迁移、侵袭能力无显著差异,适用于肿瘤生物学研究。
3. 应用场景
体内肿瘤模型:将稳转株移植至裸鼠或免疫缺陷小鼠,通过活体生物发光成像技术动态监测肿瘤生长、转移及药物治疗效果。
药物敏感性测试:结合荧光信号强度变化,定量评估抗癌药物对 TPC-1 细胞的抑制作用,计算半数抑制浓度(IC50)。
基因表达调控研究:作为报告基因系统,用于验证启动子活性、miRNA 靶点或信号通路调控机制。
4. 实验操作要点
培养条件:推荐使用 RPMI-1640 培养基,添加 10% 胎牛血清和 1% 双抗,在 37℃、5% CO2 环境下培养。
荧光检测:需外源性添加 D - 荧光素钾盐(通常浓度为 150 mg/kg),通过 IVIS 等成像系统检测信号,信号强度与细胞数量呈线性相关(R²>0.99)。
稳定性验证:定期通过 Western blot 或荧光素酶活性检测确认 ffluc 表达水平,传代至 10 代以上荧光强度下降应低于 5%。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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