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HTh-7-Puro+ffluc稳转株
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详细内容
HTh⁻⁷-Puro+ffluc稳转株
英文名称 | HTh⁻⁷-Puro+ffluc polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-H2557 |
中文名称 | ffluc 标记的 HTh⁻⁷ 稳转株 |
Lot number | HTh⁻⁷-24D3P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | (1)构建目的基因过表达慢病毒重组质粒,并包装慢病毒; (2)慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞; (3)用最佳浓度药物对细胞株进行筛选,获得混合稳转株; (4)稳转株质检(COA)。 |
完全培养基 | DMEM + 10% FBS + 1% P/S(选择添加) |
培养条件 | (1) 气相:95%空气,5% CO2;(2) 温度:37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |

相关定义:
稳转株:稳转株即稳定表达的细胞株,是基于某一细胞系构建的能够持续过表达或干扰某特定基因的细胞系。构建稳转株的原理是将外源 DNA 克隆到带有某种抗性基因的载体上,重组载体被转染至宿主细胞并整合到其染色体中,能随细胞分裂稳定传递下去,然后用载体中所含抗性基因进行筛选。
HTh - 7:通常代表特定的细胞系名称,可能是某种肿瘤细胞系或具有特定生物学特性的细胞系,但具体信息需根据相关研究背景来确定。
Puro:即嘌呤霉素(Puromycin),是一种常用的抗生素,在稳转株构建中,载体上携带的嘌呤霉素抗性基因可使转染了该载体的细胞具有对嘌呤霉素的抗性,从而可以利用嘌呤霉素来筛选出成功整合了外源基因的细胞。只有那些成功转入带有 Puro 抗性基因载体并整合到染色体上的细胞,才能在含有嘌呤霉素的培养基中存活并稳定传代。
ffluc:一般指萤火虫荧光素酶(Firefly Luciferase)基因。将 ffluc 基因导入细胞构建成稳转株后,细胞能够稳定表达萤火虫荧光素酶。该酶可以催化荧光素底物发生反应,产生生物荧光,常用于报告基因实验,通过检测荧光强度来反映基因的表达水平、细胞的活性、信号通路的激活情况等,在细胞生物学、分子生物学等领域有广泛应用,例如用于研究基因调控、药物筛选、细胞成像等方面。
构建方法:常用的方法有脂质体转染和病毒转染等。以慢病毒转染为例,首先要确定 HTh - 7 细胞系的相关信息,如培养条件、增值速度、支原体污染情况等。然后通过预实验确定慢病毒在该细胞系中的感染复数(MOI)以及筛选药物嘌呤霉素的用量。接着进行细胞铺板、细胞感染,感染后第二天换液,转染 48 小时后用嘌呤霉素进行筛选,筛选结束后进行单克隆化,选择阳性克隆进行培养,最终得到 HTh - 7 - Puro + ffluc 稳转株。
应用领域:由于该稳转株能稳定表达 ffluc,可用于多种实验研究。比如在药物研发中,可通过检测荧光素酶的活性来评估药物对细胞内特定信号通路或基因表达的影响,进而筛选出具有潜在疗效的药物;在细胞生物学研究中,可用于观察细胞在不同生理或病理条件下的基因表达变化;在动物实验中,将该稳转株接种到动物体内,利用活体成像技术,通过检测荧光信号来追踪细胞在体内的生长、迁移和分布情况等。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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