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BCPAP-Puro+ffluc稳转株
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详细内容
BCPAP-Puro+ffluc稳转株
英文名称 | BCPAP-Puro+ffluc polyclonal stable cell line |
产品货号 | XY-H2544 |
中文名称 | ffluc 标记的 BCPAP 稳转株 |
Lot number | BCPAP-24D3P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | (1)构建目的基因过表达慢病毒重组质粒,并包装慢病毒; (2)慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞; (3)用最佳浓度药物对细胞株进行筛选,获得混合稳转株; (4)稳转株质检(COA)。 |
完全培养基 | RPMI-1640 + 10% FBS + 1% P/S(选择添加) |
培养条件 | (1) 气相:95%空气,5% CO2;(2) 温度:37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |

1. 构建方法与特性
构建流程:通过慢病毒载体将 ffluc 基因和 Puro 抗性基因导入 BCPAP 细胞,经嘌呤霉素筛选后获得稳定整合外源基因的细胞克隆。
筛选标记:Puro 抗性基因用于药物筛选,确保只有成功整合外源基因的细胞存活。
荧光素酶表达:ffluc 作为报告基因,可通过荧光素酶检测系统(如萤火虫荧光素酶检测试剂盒)定量或定性分析基因表达水平,常用于体内成像、药物筛选等实验。
2. 应用场景
基因表达研究:可通过荧光素酶活性反映特定基因的转录或翻译水平,例如验证启动子活性、评估药物对基因表达的调控作用。
体内成像:将该细胞株接种至动物模型后,通过荧光素酶成像技术追踪肿瘤生长、转移及药物疗效。
药物筛选:结合荧光素酶活性变化,高通量筛选潜在的抗肿瘤药物或评估药物对特定信号通路的影响。
3. 获取方式
商业渠道:部分生物科技公司(如通派生物、上海雅吉生物)提供 BCPAP 荧光标记稳转株,可通过其官网或联系客服咨询具体产品(如 Bcpap+LUC 或 BCPAP/LUC,可能与 BCPAP-Puro+ffluc 为同一类型细胞株)。
定制服务:若需特定标记或筛选条件的稳转株,可委托专业机构(如丁香通合作实验室)进行个性化构建,需提供目的基因质粒及细胞系。
4. 培养与维护
培养基:推荐使用 RPMI 1640 培养基,添加 10% 胎牛血清(FBS)和 1% 双抗(青霉素 - 链霉素)。
传代比例:建议 1:2 传代,消化时间 3-5 分钟,避免过度消化影响细胞状态。
筛选压力:长期培养时,可定期加入嘌呤霉素(浓度需通过预实验确定,通常为 1-10 µg/ml)以维持外源基因的稳定表达。
冻存条件:使用含 90% FBS 和 10% DMSO 的冻存液,程序降温后保存于液氮中。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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