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U87 MG-Puro+GFAP(h)稳转株
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详细内容
U87 MG-Puro+GFAP(h)稳转株
产品名称 | U87 MG-Puro+GFAP(h) 稳转株 |
产品货号 | XY-H2753 |
中文名称 | GFAP 过表达 U87 MG 稳转株 |
Lot number | U87 MG-33C6P |
细胞规格 | 1 × 106细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | (1)构建目的基因过表达慢病毒重组质粒,并包装慢病毒; (2)慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞; (3)用最佳浓度药物对细胞株进行筛选,获得混合稳转株; (4)稳转株质检(COA)。 |
完全培养基 | DMEM-H + 10% FBS |
培养条件 | (1) 气相:95%空气,5% CO2;(2) 温度:37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |
传代方法 | 建议1 : 2 ~ 1 : 3传代,每2 ~ 3天换液1次 |
运输条件 | 活细胞常温运输或冻存细胞干冰运输。 |

细胞来源与背景
U87 MG 细胞:U87 MG 是人脑星形胶质母细胞瘤细胞系,在癌症研究,尤其是胶质母细胞瘤相关的研究中应用广泛。它具有肿瘤细胞的特性,如无限增殖能力等,常被用作研究肿瘤发生发展机制、药物筛选等实验的模型细胞。
稳转株特点
GFAP (h) 表达:GFAP 是胶质纤维酸性蛋白(Glial Fibrillary Acidic Protein)的缩写,它是胶质细胞的标志性蛋白之一。这里的 GFAP (h) 可能表示人源的 GFAP 基因。该稳转株稳定表达人源 GFAP,这使得它可用于研究 GFAP 在胶质细胞相关生理或病理过程中的作用,比如在胶质细胞分化、星形胶质细胞相关疾病(如某些脑部神经疾病或肿瘤微环境中星形胶质细胞的功能研究等)中的功能。通过稳定表达 GFAP,研究者可以更方便地观察和分析 GFAP 表达变化对细胞行为和功能的影响。
Puro(嘌呤霉素)抗性:Puro 即嘌呤霉素,是一种抗生素。该稳转株具有嘌呤霉素抗性,这是在构建稳转株过程中引入的筛选标记。在细胞培养过程中,加入嘌呤霉素可以筛选出成功导入目标基因(如 GFAP (h) 基因)并稳定表达的细胞。因为只有成功整合了包含嘌呤霉素抗性基因和目标基因的表达载体的细胞才能在含有嘌呤霉素的培养基中存活,而未成功转化的细胞则会被嘌呤霉素杀死。
构建方法(通常情况)
一般是通过慢病毒载体等基因传递工具将包含人源 GFAP 基因和嘌呤霉素抗性基因的表达载体导入 U87 MG 细胞。具体步骤可能如下:
构建含有 GFAP (h) 基因和嘌呤霉素抗性基因的慢病毒载体,通常还会有一些调控元件如启动子(可能不是题目中的 CMV 启动子,但类似作用是启动基因表达)等。
用构建好的慢病毒载体感染 U87 MG 细胞,使载体进入细胞并将目的基因整合到细胞基因组中。
感染后的细胞在含有嘌呤霉素的培养基中培养,筛选出具有抗性的细胞,这些细胞就是成功导入并稳定表达 GFAP (h) 基因的稳转株。
对筛选出的稳转株进行鉴定和验证,包括检测 GFAP (h) 基因的表达水平、细胞的稳定性(如经过多次传代后基因表达和细胞特性是否稳定)等。
应用领域
肿瘤研究:由于 U87 MG 是肿瘤细胞系,稳定表达 GFAP 后可研究 GFAP 与肿瘤细胞生物学行为的关系,比如对肿瘤细胞增殖、迁移、侵袭等能力的影响,以及在肿瘤微环境中星形胶质细胞(通过表达 GFAP 模拟)与肿瘤细胞相互作用的机制等。
神经生物学研究:可用于研究胶质细胞的功能和调控机制,例如 GFAP 表达调控对胶质细胞形态、代谢和信号传导的影响,以及在神经系统发育、损伤修复等过程中的作用。
药物研发:作为模型细胞用于筛选针对胶质细胞相关疾病或肿瘤的药物。例如,观察药物对表达 GFAP 的 U87 MG 稳转株的作用,包括对 GFAP 表达的影响、对细胞功能的影响等,从而评估药物的疗效和作用机制。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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