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B16F10-Puro+OVA(OPT)稳转株
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品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/19 10:48:21
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详细内容
B16F10-Puro+OVA(OPT)稳转株
产品名称 | B16F10-Puro+OVA(OPT) 稳转株 |
产品货号 | XY-M1358 |
中文名称 | OVA(OPT) 过表达 B16F10 稳转株 |
Lot number | B16F10-51A6P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | （1）构建目的基因过表达慢病毒重组质粒，并包装慢病毒； （2）慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞； （3）用最佳浓度药物对细胞株进行筛选，获得混合稳转株； （4）稳转株质检（COA）。 |
完全培养基 | RPMI-1640 + 10% FBS + 1% P/S（选择添加） |
培养条件 | (1) 气相：95%空气，5% CO2；(2) 温度：37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |
细胞系背景
B16F10 细胞：是小鼠黑色素瘤细胞系，具有黑色素瘤细胞的特性，如能产生黑色素等。在不同培养条件下，细胞汇合度与黑色素斑点形成有一定关系，例如在 1640 培养体系下，细胞汇合度大于 95% 可能出现少量黑色素斑点，在 H-DMEM 培养体系下，细胞汇合度大于 95% 则会出现大量黑色素斑点。
稳转株构建相关
转染基因：
OVA：通常指鸡卵清蛋白基因（serpin b16），将其编码序列通过慢病毒转导等方式导入 B16F10 细胞。OVA 基因的表达可提高肿瘤细胞的免疫原性，常用于免疫肿瘤学研究，如筛选免疫治疗药物的疗效等。
Puro：嘌呤霉素抗性基因。在构建稳转株过程中，利用嘌呤霉素进行筛选，只有成功转染并稳定表达 Puro 基因的细胞才能在含有嘌呤霉素的培养基中存活，从而筛选出稳定转染 OVA 基因的细胞株。一般 B16F10 细胞构建稳转株时，嘌呤霉素筛选浓度在 1 - 10µg/ml，不同实验室可能会因实验条件等因素有所差异，比如有的使用 2µg/ml 筛选高阳性率稳定株，也有使用 1µg/ml 等情况。
构建方法：常用慢病毒感染结合药物筛选法。先将携带 OVA 基因和 Puro 基因的慢病毒感染 B16F10 细胞，然后在培养基中添加嘌呤霉素进行筛选，经过多轮筛选和培养，获得稳定表达 OVA 基因的 B16F10-Puro+OVA (OPT) 稳转株。
培养条件
培养基：常用 DMEM 或 1640 培养基添加 10% 胎牛血清（FBS）等成分。例如，有的实验室使用 DMEM + 10% FBS + 1µg/ml 嘌呤霉素作为 B16F10-OVA 细胞的培养条件；也有 1640 + 10% FBS 等基础配方，再根据需要添加嘌呤霉素等筛选药物和双抗等成分。
培养环境：通常在 37℃、5%CO2 的培养箱中培养。
应用领域
主要用于免疫肿瘤学研究：
由于 OVA 表达提高了细胞免疫原性，可用于筛选免疫治疗药物对肿瘤细胞的作用，评估免疫治疗的疗效。
构建动物模型，将该稳转株接种到小鼠体内，研究肿瘤的生长、转移以及免疫细胞对肿瘤的反应等，为免疫肿瘤学的基础研究和药物开发提供模型支持。
保存与复苏
保存：一般冻存于液氮中，短期也可在 - 80℃保存。
复苏：使用合适的细胞冻存液，如 “90% FBS + 16% DMSO 配方” 的冻存液，复苏时细胞成活率可能更高。复苏操作需迅速将冻存细胞放入 37℃水浴中解冻，然后转移到合适的培养基中培养。
仅用于科研，不能用于临床诊断！所有产品仅供科研使用，不得用于人或动物的治疗等任何其他用途，不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。
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