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RM-1-Puro+OVA(OPT)稳转株
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详细内容
RM-1-Puro+OVA(OPT)稳转株
产品名称 | RM-1-Puro+OVA(OPT) 稳转株 |
产品货号 | XY-M1373 |
中文名称 | OVA(OPT) 过表达 RM-1 稳转株 |
Lot number | RM-1-51A6P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 成纤维细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | (1)构建目的基因过表达慢病毒重组质粒,并包装慢病毒; (2)慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞; (3)用最佳浓度药物对细胞株进行筛选,获得混合稳转株; (4)稳转株质检(COA)。 |
完全培养基 | RPMI-1640 + 10% FBS + 1% P/S(选择添加) |
培养条件 | (1) 气相:95%空气,5% CO2;(2) 温度:37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存 |
存储条件 | 液氮 |

名称解析
RM-1:通常是指一种细胞系,可能是某种肿瘤细胞系等,不同的研究领域和实验室可能会对特定的细胞系有这样的命名,它代表了稳转株构建的基础细胞类型。
Puro:是嘌呤霉素(Puromycin)的缩写。在稳转株构建中,嘌呤霉素常作为一种筛选标记。带有嘌呤霉素抗性基因的载体转染细胞后,在培养过程中加入嘌呤霉素,只有成功整合了载体(即转染成功)的细胞才能存活并增殖,未转染的细胞则会被杀死,从而筛选出稳定转染的细胞株。
OVA(OPT):OVA 一般指卵清蛋白(Ovalbumin),OPT 可能表示经过优化(Optimized)的卵清蛋白基因。也就是说,该稳转株是将优化后的卵清蛋白基因导入到 RM-2 细胞系中,并通过嘌呤霉素筛选得到的稳定表达该基因的细胞株。
构建过程
一般来说,构建 RM-1-Puro+OVA (OPT) 稳转株可能包括以下步骤(具体操作可能因实验室条件和方法略有差异):
载体构建:将优化后的 OVA 基因克隆到带有 Puro 抗性基因的载体上,构建成重组载体。
细胞培养:培养 RM-1 细胞,使其处于对数生长期,为转染做好准备,需注意细胞的培养条件,如培养基类型、温度、湿度、二氧化碳浓度等。
转染:采用合适的转染方法,如脂质体转染法、病毒转染法(常用慢病毒转染)等,将重组载体导入 RM-1 细胞。如果是病毒转染,需要行病毒包装,获得携带目的基因(OVA (OPT))和抗性基因(Puro)的病毒颗粒,再用病毒感染 RM-2 细胞。
筛选:转染后的细胞在含有嘌呤霉素的培养基中进行筛选。未成功转染的细胞因无嘌呤霉素抗性而死亡,而成功转染并整合了重组载体的细胞则能够存活下来,并逐渐形成稳定转染的细胞株。
鉴定:对筛选得到的稳转株进行鉴定,包括检测 OVA (OPT) 基因的表达水平(如通过 RT-PCR 检测 mRNA 水平,或通过 Western blot 检测蛋白水平),以及确认细胞株的稳定性(如多次传代后仍能稳定表达目的基因)。
应用
免疫研究:卵清蛋白常作为一种模型抗原用于免疫相关的研究。RM-1-Puro+OVA (OPT) 稳转株可用于研究机体对 OVA 抗原的免疫反应,如抗原呈递、T 细胞激活、抗体产生等过程。例如,将该稳转株注射到动物体内,观察动物的免疫应答情况,有助于了解免疫系统对特定抗原的识别和反应机制,也可用于疫苗研发等方面的研究,评估疫苗诱导免疫反应的效果。
肿瘤研究:如果 RM-1 是肿瘤细胞系,那么该稳转株可用于研究 OVA 抗原在肿瘤微环境中的作用,以及免疫系统对肿瘤细胞(表达 OVA 抗原)的杀伤作用等。还可以用于筛选针对表达 OVA 抗原的肿瘤细胞的新型治疗方法或药物,观察这些治疗手段对稳转株细胞生长、增殖、凋亡等方面的影响。
基因功能研究:通过稳定表达 OVA (OPT) 基因,可研究该基因及其表达产物对 RM-1 细胞的生物学特性(如细胞生长、分化、迁移、侵袭等)的影响,探索相关的信号通路和分子机制。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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