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HEK-293T-Puro+MLPH稳转株
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详细内容
HEK-293T-Puro+MLPH稳转株
产品名称 | HEK-293T-Puro+MLPH 稳转株 |
产品货号 | XY-H2726 |
中文名称 | MLPH 过表达 HEK-293T 稳转株 |
Lot number | HEK-293T-51H9P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | (1)构建目的基因过表达慢病毒重组质粒,并包装慢病毒; (2)慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞; (3)用最佳浓度药物对细胞株进行筛选,获得混合稳转株; (4)稳转株质检(COA)。 |
完全培养基 | DMEM-H + 10% FBS + 1% P/S(选择添加) |
培养条件 | (1) 气相:95%空气,5% CO2;(2) 温度:37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |

一、基本概念
HEK-293T 细胞
来源:人胚肾细胞系,经腺病毒 E1A 基因转化,广泛应用于病毒包装、蛋白表达等实验。
特性:贴壁生长,转染效率高,适合构建稳定表达细胞株。
稳转株(稳定转染细胞株)
指通过基因工程手段将外源基因(如目的基因 MLPH)整合到细胞基因组中,使目的基因能在细胞中长期稳定表达的细胞群体。
优势:可避免瞬时转染的表达时效性,适用于长期研究(如蛋白功能分析、药物筛选等)。
Puro(嘌呤霉素)
常用的真核细胞筛选抗生素,通过抑制蛋白质合成杀死未成功整合外源基因的细胞。
在稳转株构建中,Puro 抗性基因常作为筛选标记,与目的基因(如 MLPH)共表达,便于通过添加 Puro 筛选出成功转染的细胞。
二、构建流程(示意图)
获取MLPH基因序列
构建含MLPH和Puro抗性的质粒载体
将质粒转染至HEK-293T细胞
加入Puro进行筛选(未整合质粒的细胞死亡)
单克隆化(如有限稀释法)
鉴定MLPH表达水平(Western blot等)
获得稳定表达MLPH的HEK-293T-Puro+MLPH细胞株
三、关键应用场景
蛋白功能研究
用于分析 MLPH 蛋白的亚细胞定位、互作蛋白或信号通路调控机制。
例:若 MLPH 与细胞骨架相关,可通过稳转株观察其对细胞迁移能力的影响。
病毒包装系统
HEK-293T 是常用的病毒包装细胞(如慢病毒、腺病毒),稳转株可用于生产携带 MLPH 基因的病毒颗粒,进一步感染目标细胞。
药物筛选模型
若 MLPH 与疾病(如癌症、免疫疾病)相关,可利用稳转株筛选调控 MLPH 表达或功能的小分子化合物。
基因编辑验证
作为对照细胞株,验证 CRISPR-Cas9 等基因编辑工具对 MLPH 基因的敲除 / 敲入效率。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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