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K562-RFP-Puro+EGFRvIIIt单克隆株
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详细内容
K562-RFP-Puro+EGFRvIIIt单克隆株
产品名称 | K562-RFP-Puro+EGFRvIIIt Monoclonal cell line |
产品货号 | XY-H2663 |
中文名称 | EGFRvIIIt 过表达K562单克隆细胞株 |
细胞规格 | 1 × 106细胞 |
细胞形态 | 淋巴母细胞样 |
生长特性 | 悬浮生长 |
产品介绍
| 1.亲株细胞系:该细胞是由Lozzio从一名53岁的慢性髓细胞性白血病急变期的女性患者的胸水中分离建立的。该细胞曾被认为来源于粒系,处于高度未分化阶段;Anderson等人作了细胞膜特性的研究后,认为该细胞是红白血病细胞系。该细胞是对自然杀伤细胞高度敏感的体外靶标,故而被广泛应用于这方面的研究。K562的原始细胞是一种具有多向分化潜能的造血系统的恶性肿瘤细胞,能自发分化为红系、粒系和单核系的可辨识的祖细胞。 2.过表达基因EGFRvIII:EGFRvIII是表皮生长因子受体EGFR的2~7 外显子缺失形成的突变体。据报道,约5%的人肺鳞状细胞癌(SCC)中存在EGFRvIII突变。EGFRvIII可能在人NSCLC肿瘤的发生、发展中起重要作用。吉非替尼、厄洛替尼和HKI-272等药物可抑制EGFRvIII转化细胞的增殖和EGFRvIII阳性肿瘤的生长。 3.EGFRvIIIt:EGFRvIII全长基因缺失胞内段的突变体。 4.K562-RFP-Puro+EGFRvIIIt 单克隆细胞株:该细胞株是由慢病毒Lenti-RFP-Puro+EGFR vIIIt转导K562细胞经嘌呤霉素筛选和无限稀释法筛选构建而成,该细胞能在体外稳定过表达EGFRvIIIt和RFP。 5.细胞株质检:该单克隆细胞株在本库通过支原体检测,其亲代细胞在本库通过STR鉴定。 6.应用领域:CART的免疫治疗靶点。 |
完全培养基 | RPMI-1640 + 10% FBS |
培养条件 | (1) 气相:95%空气,5% CO2;(2) 温度:37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液(VGA-0046-0100) |
存储条件 | 液氮 |
传代方法 | 建议1 : 2 ~ 1 : 4传代,每2 ~ 3天传代或换液1次 |
运输条件 | 活细胞常温运输或冻存细胞干冰运输。 |

亲本细胞株 K562
来源:K562 细胞是由 Lozzio 从一位临终的 53 岁女性慢性骨髓性白血病患者的胸水中建立,属于人慢性髓系白血病细胞,也被认为是红白血病细胞系。它是对自然杀伤细胞高度敏感的体外靶标,原始细胞是具有多向分化潜能的造血系统恶性肿瘤细胞,能自发分化为红系、粒系和单核系的祖细胞。
相关基因信息
RFP:即红色荧光蛋白(Red Fluorescent Protein),是一种报告基因。它可发射明亮的红色荧光,能用于直观地检测细胞内基因的表达情况、细胞的定位和追踪等。在 K562-RFP-Puro+EGFRvIIIt 细胞株中,RFP 基因的表达可使细胞发出红色荧光,便于在荧光显微镜等设备下进行观察和筛选等操作。
Puro:通常指嘌呤霉素(Puromycin)抗性基因。其作用是使细胞具有对嘌呤霉素的抗性。在细胞培养过程中,加入嘌呤霉素可以筛选出成功转入包含 Puro 基因载体的细胞,只有携带 Puro 抗性基因的细胞才能在含有嘌呤霉素的培养基中存活,从而实现对转基因细胞的筛选和维持转基因细胞的稳定表达。
EGFRvIIIt:EGFR 是表皮生长因子受体(Epidermal Growth Factor Receptor),EGFRvIIIt 是其一种变异体基因。EGFR 及其变异体在细胞的生长、增殖、分化等过程中发挥重要作用,异常表达或变异可能与肿瘤的发生、发展等相关。将 EGFRvIIIt 基因转入 K562 细胞并筛选出单克隆株,可能是为了研究该变异体在白血病细胞中的功能、信号传导途径,或者用于开发针对该变异体的靶向治疗方法等。
单克隆株
单克隆株是通过特定的筛选方法(如有限稀释法等)获得的源自单个细胞的细胞群体。这意味着该细胞株中的所有细胞在基因和生物学特性上相对一致,避免了细胞群体中不同细胞之间的差异对实验结果的影响,使得实验结果更具可重复性和可靠性。对于 K562-RFP-Puro+EGFRvIIIt 单克隆株,就是经过筛选得到的同时表达 RFP、具有 Puro 抗性且稳定表达 EGFRvIIIt 基因的单一细胞来源的细胞株,可用于各种基础研究和药物研发等领域,如研究 EGFRvIIIt 相关的细胞生物学功能、筛选针对 EGFRvIIIt 的靶向药物等。
应用领域
肿瘤研究:由于其具有特定的基因表达和细胞特性,可用于研究白血病及与 EGFRvIIIt 相关的肿瘤的发病机制、细胞信号传导通路等。例如,通过观察细胞在不同条件下的生长、增殖、凋亡情况,分析 EGFRvIIIt 对 K562 细胞生物学行为的影响。
药物研发:作为体外模型,用于筛选和评价针对 EGFRvIIIt 或相关信号通路的抗癌药物。可以观察药物对该细胞株的增殖抑制、诱导凋亡等作用,为临床前药物研究提供数据支持。同时,RFP 的存在也便于在药物作用研究中对细胞进行跟踪和分析。
培养与保存
培养条件:一般来说,K562 细胞常用 RPMI 1640 培养基等进行培养,并添加适量的血清(如 10% 胎牛血清)等营养成分。对于 K562-RFP-Puro+EGFRvIIIt 单克隆株,可能还需要在培养基中添加嘌呤霉素来维持其抗性,但具体培养条件可能因实验需求和实验室习惯略有差异,且长期培养时需注意细胞的传代时机和密度等问题,避免细胞老化或发生性状改变。
保存:通常采用液氮冷冻保存的方法,将细胞冻存于液氮中,以便在需要时复苏使用。在冻存过程中,需要使用合适的冻存液,并遵循正确的冻存程序,以保证细胞的存活率和生物学特性在复苏后不受太大影响。
总之,K562-RFP-Puro+EGFRvIIIt 单克隆株是一种具有特定基因修饰和生物学特性的细胞工具,在肿瘤研究和药物研发等领域具有重要的应用价值。但在使用过程中,需要遵循细胞培养和实验的相关规范,以确保实验结果的准确性和可靠性。如果你还想了解关于该细胞株的更具体信息,如特定实验操作、相关研究案例等,可以进一步提问。
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