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HEK-293T-Puro+CD19(h)稳转株
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详细内容
HEK-293T-Puro+CD19(h)稳转株
产品名称 | HEK-293T-Puro+CD19(h) 稳转株 |
产品货号 | XY-H2710 |
中文名称 | CD19(h) 过表达 HEK-293T 稳转株 |
Lot number | HEK-293T-32E7P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | (1)构建目的基因过表达慢病毒重组质粒,并包装慢病毒; (2)慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞; (3)用最佳浓度药物对细胞株进行筛选,获得混合稳转株; (4)稳转株质检(COA)。 |
完全培养基 | DMEM-H + 10% FBS + 1% P/S(选择添加) |
培养条件 | (1) 气相:95%空气,5% CO2;(2) 温度:37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |

HEK-293T-Puro+CD19 (h) 稳转株概述
HEK-293T-Puro+CD19 (h) 稳转株是基于人胚肾细胞系(HEK-293T)构建的稳定转染细胞株,通过基因工程手段将特定外源基因(如携带嘌呤霉素抗性基因和人源 CD19 基因的载体)整合到细胞基因组中,使其能够持续表达目标蛋白并稳定传代。以下从背景、特性、应用及操作要点等方面展开说明:
一、背景与构建原理
细胞系背景
HEK-293T 细胞是 HEK-293 细胞的衍生株,表达 SV40 大 T 抗原,常用于病毒包装(如慢病毒、腺病毒)和外源基因表达,因其转染效率高、增殖速度快且易于培养而被广泛使用。
“Puro” 指嘌呤霉素(Puromycin)抗性基因,用于筛选成功转染的细胞(未整合抗性基因的细胞会被嘌呤霉素杀死)。
“CD19 (h)” 中的 “h” 代表人源(human),即该细胞株表达人源 CD19 蛋白(Cluster of Differentiation 19),CD19 是 B 细胞表面特异性抗原,在免疫细胞研究、CAR-T 细胞疗法等领域具有重要作用。
构建流程
通过载体(如质粒)将Puro 抗性基因和人源 CD19 基因共转染至 HEK-293T 细胞。
利用嘌呤霉素筛选获得稳定整合外源基因的单克隆细胞株,经鉴定(如流式细胞术检测 CD19 表达)后扩大培养。
二、关键特性
特性 说明
细胞形态 贴壁生长,呈上皮样细胞形态,多边形或梭形。
生长特性 倍增时间约 24-36 小时,适合在含 10% 胎牛血清(FBS)的 DMEM 培养基中培养。
抗性标记 对嘌呤霉素(Puro)具有抗性,筛选浓度通常为 1-5 µg/mL(需预实验优化)。
CD19 表达水平 高表达人源 CD19 蛋白,可通过流式细胞术(FACS)检测其表面抗原表达强度。
稳定性 传代≥20 代后,外源基因(CD19 和 Puro 抗性)表达保持稳定。
污染检测 无细菌、真菌、支原体污染,且不含有 HIV-1、HBV、HCV 等病毒。
三、主要应用场景
免疫学研究
作为 CD19 抗原的阳性对照细胞,用于抗体(如 CD19 单克隆抗体)的开发与验证。
模拟 B 细胞表面微环境,研究 CD19 参与的信号通路(如 B 细胞受体信号)。
CAR-T 细胞疗法开发
用于 CAR-T 细胞(靶向 CD19)的体外杀伤实验:将 CAR-T 细胞与该稳转株共培养,通过流式细胞术或 MTT 法检测 CAR-T 细胞对 CD19 阳性细胞的特异性杀伤能力。
评估 CAR-T 细胞的结合效率和脱靶效应。
病毒载体生产
利用 HEK-293T 细胞的高效转染特性,生产携带 CD19 相关基因的病毒载体(如慢病毒),用于基因治疗或细胞改造。
药物筛选
作为模型细胞,筛选靶向 CD19 的小分子药物或蛋白药物,评估药物与 CD19 的结合能力及细胞毒性。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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