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A549-RFP-Puro+EGFRvIIIt单克隆株
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详细内容
A549-RFP-Puro+EGFRvIIIt单克隆株
英文名称 | A549-RFP-Puro+EGFRvIIIt monoclonal stable cell line |
产品货号 | XY-H2687 |
中文名称 | EGFRvIIIt 过表达A549单克隆株 |
Lot number | A549-32A6S |
细胞规格 | 1 × 106细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
产品介绍
| 1.亲株细胞系:A-549细胞是于1972年由D.J.Giard等人通过从一名58岁白人男性的肺癌组织中进行外植体培养而建立的,角蛋白呈阳性。M.Lieber等人的研究表明,A549细胞可以利用胞苷二磷酸胆碱途径合成富含不饱和脂肪酸的卵磷脂。A-549细胞可用于癌症、免疫肿瘤学和毒理学研究,也是一种合适的转染宿主。 2.过表达基因EGFRvIII:EGFRvIII是表皮生长因子受体EGFR的2~7 外显子缺失形成的突变体。据报道,约5%的人肺鳞状细胞癌(SCC)中存在EGFRvIII突变。EGFRvIII可能在人NSCLC肿瘤的发生、发展中起重要作用。吉非替尼、厄洛替尼和HKI-272等药物可抑制EGFRvIII转化细胞的增殖和EGFRvIII阳性肿瘤的生长。 3.EGFRvIIIt:EGFRvIII全长基因缺失胞内段的突变体。 4.A549-RFP-Puro+EGFRvIIIt 单克隆株:该细胞株是由慢病毒Lenti-RFP-Puro+EGFR vIIIt转导A549细胞经嘌呤霉素筛选和无限稀释法筛选构建而成,该细胞能在体外稳定过表达EGFRvIIIt和RFP。 5.细胞株质检:该单克隆株在本库通过支原体检测,其亲代细胞在本库通过STR鉴定。 6.应用领域:CART的免疫治疗靶点。 |
完全培养基 | F-12K + 10% FBS |
培养条件 | (1) 气相:95%空气,5% CO2;(2) 温度:37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |
传代方法 | 建议1 : 3 ~ 1 : 8传代,每2 ~ 3天传代或换液1次。 |
运输条件 | 活细胞常温运输或冻存细胞干冰运输。 |

细胞来源与背景
起源:A549 细胞是 1972 年由 D.J. Giard 通过肺癌组织移植培养建系的,源自一位 58 岁的白人男性,是一种人非小细胞肺癌细胞。
改造过程:在此基础上,经过一系列基因工程操作构建成 A549-RFP-Puro+EGFRvIIIt 单克隆株。其中,“RFP” 通常指红色荧光蛋白(Red Fluorescent Protein),通过基因转染等技术使 A549 细胞稳定表达 RFP,这使得细胞在荧光显微镜下能发出红色荧光,便于在体外和体内对细胞进行追踪、观察和研究,例如用于研究细胞的增殖、迁移、分化以及在动物模型中的肿瘤形成和转移等过程;“Puro” 指嘌呤霉素(Puromycin),是一种抗生素,细胞中转入含嘌呤霉素抗性基因的载体后,就可以在培养过程中用嘌呤霉素筛选出成功导入目的基因的细胞,只有整合了相关基因并表达嘌呤霉素抗性的细胞才能在含嘌呤霉素的培养基中存活;“EGFRvIIIt” 是表皮生长因子受体(EGFR)的一种突变体,通过基因编辑或基因转染技术将编码 EGFRvIIIt 的基因导入 A549 细胞中,使其表达该突变蛋白。EGFR 在细胞生长、增殖、分化等过程中起重要作用,其突变体 EGFRvIIIt 常见于一些肿瘤细胞中,研究这种突变体在 A549 细胞中的作用,有助于深入了解肿瘤的发生发展机制、筛选针对 EGFRvIIIt 的靶向药物等。
应用领域
肿瘤研究:可用于研究肺癌细胞的生物学特性,如细胞增殖、凋亡、侵袭和转移等过程中 EGFRvIIIt 突变体的作用机制。例如,通过观察表达 EGFRvIIIt 的 A549 细胞与正常 A549 细胞在生长速度、细胞周期分布等方面的差异,揭示该突变对肿瘤细胞生长的影响。也可用于研究肿瘤细胞对不同药物的敏感性,特别是针对 EGFR 及其突变体的靶向药物。通过在该细胞株上进行药物筛选实验,评估药物对表达 EGFRvIIIt 的肺癌细胞的抑制作用,为肺癌的治疗提供理论依据和潜在的治疗靶点。
药物开发:作为模型细胞株,用于筛选和评估针对 EGFRvIIIt 的新型抗癌药物。研究人员可以将不同的化合物或生物制剂作用于 A549-RFP-Puro+EGFRvIIIt 单克隆株,观察细胞的反应,如细胞活力、凋亡率、信号通路变化等,以确定药物的疗效和作用机制。还可用于研究药物的耐药性问题,长期培养该细胞株并施加药物压力,观察细胞对药物的耐受性变化,探讨耐药机制,为开发克服耐药的策略提供帮助。
基础生物学研究:有助于研究 EGFR 信号通路及其突变对细胞生理功能的影响。EGFR 信号通路在细胞的生长、分化、代谢等过程中起着关键作用,EGFRvIIIt 突变可能导致信号通路的异常激活或改变。通过对该细胞株的研究,可以深入了解信号通路的调控机制以及突变对细胞功能的影响,为基础生物学研究提供重要的模型。
培养与保存
培养条件:一般来说,A549 细胞的基础培养条件适用于 A549-RFP-Puro+EGFRvIIIt 单克隆株,但由于其表达特殊的蛋白和具有抗性标记,可能在培养基中需要添加嘌呤霉素以维持其特性。通常使用的培养基为 DMEM 等,添加 10% 左右的胎牛血清(FBS)、1% 的青霉素 / 链霉素等抗生素,培养环境为 37℃、5%CO2 。在培养过程中,需要注意细胞的密度,当细胞达到一定汇合度(如 80% - 90%)时,需要进行传代培养,传代比例一般为 1:3 - 1:6,每 2 - 3 天换液一次。
保存条件:如需长期保存,通常采用液氮冷冻保存。将细胞消化、离心后,用含有 60% 基础培养基、30% FBS 和 10% DMSO(二甲基亚砜)的冻存液重悬细胞,然后放入液氮中保存。在复苏时,快速将冻存管放入 37℃水浴中解冻,然后转移到培养基中进行培养。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
热门标签:A549-RFP-Puro+EGFRvIIIt单克隆株,EGFRvIIIt,过表达A549单克隆株,A549-RFP-Puro+EGFRvIIIt,monoclonal,stable,cell,line















