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K562-GFP-Puro+GPC3(h)单克隆株
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品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/16 11:04:22
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详细内容
K562-GFP-Puro+GPC3(h)单克隆株
产品名称 | K562-GFP-Puro+GPC3(h) 单克隆细胞株 |
产品货号 | XY-H2668 |
中文名称 | GPC3(h) 过表达 K562 单克隆细胞株 |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 淋巴母细胞样 |
生长特性 | 悬浮生长 |
细胞株 构建流程 | （1）构建目的基因过表达慢病毒重组质粒，并包装慢病毒； （2）慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞； （3）用最佳浓度药物对细胞株进行筛选，获得混合稳转细胞株； （4）采用无限稀释法筛选单克隆细胞株； （5）单克隆细胞株质检（COA）。 |
完全培养基 | RPMI-1640 + 10% FBS + 1% P/S（选择添加） |
培养条件 | (1) 气相：95%空气，5% CO2；(2) 温度：37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |
共享方式 | 公益性共享 |
细胞来源与背景
基础细胞系：K562 细胞是一种人慢性髓原白血病细胞，由 Lozzio 从一位临终的 53 岁女性慢性骨髓性白血病患者的胸水中建立，属于高度未分化的粒性白细胞类，也被认为是人类红白血病细胞，具有性造血恶性细胞的特征，能自发分化成红血球祖细胞、粒性白细胞、单核细胞等。
基因改造情况
GFP 基因：GFP 即绿色荧光蛋白基因，被导入到 K562 细胞中。GFP 在细胞内表达后，会发出绿色荧光，这使得研究者可以通过荧光显微镜或流式细胞术等方法，方便地观察和分选表达该蛋白的细胞，用于细胞追踪、细胞生物学研究以及监测细胞的生长、分化和迁移等过程。
Puro 基因：Puro 是嘌呤霉素抗性基因。导入该基因后，细胞对嘌呤霉素产生抗性。在细胞培养过程中，加入嘌呤霉素可以筛选出成功导入了包含 Puro 基因载体（通常也携带其他目的基因如 GFP 和 GPC3 (h)）的细胞，未成功导入的细胞会被嘌呤霉素杀死，从而获得稳定转染的细胞株。
GPC3 (h) 基因：GPC3（glypican-3）是一种细胞表面蛋白聚糖，GPC3 (h) 中的 “h” 可能表示人类（human），即该基因是人类来源的 GPC3 基因。GPC3 在某些组织和器官的生长调节、肿瘤的发生发展等过程中可能发挥作用，如抑制二肽基肽酶活性、调节 IGF2 与受体的相互作用等。将 GPC3 (h) 基因导入 K562 细胞，可能是为了研究 GPC3 在白血病细胞中的功能，或者探讨其作为肿瘤治疗靶点等方面的作用。
单克隆株的形成
通过特定的细胞生物学技术，如有限稀释法或单细胞克隆技术，从经过基因改造的 K562 细胞群体中分离出单个细胞，然后让这个单个细胞在培养条件下增殖，形成一个细胞群体，这个群体中的所有细胞都来源于同一个祖先细胞，即为单克隆株。单克隆株的细胞在基因和生物学特性上相对一致，便于进行各种实验研究，减少细胞个体差异带来的影响。
应用领域
肿瘤研究：由于 K562 细胞本身是白血病细胞，且导入了与肿瘤相关的 GPC3 基因，可用于研究 GPC3 在白血病细胞中的功能，以及探讨针对 GPC3 的肿瘤治疗策略，例如开发以 GPC3 为靶点的药物、研究免疫细胞对表达 GPC3 的白血病细胞的识别和杀伤作用等。
细胞生物学研究：GFP 的表达使得该细胞株可作为模型，用于研究细胞的生长、分化、凋亡、迁移等基本生物学过程，以及研究各种信号通路在这些过程中的调控作用。
药物筛选：可用于筛选能够影响 K562 细胞生长、增殖、分化或与 GPC3 相关功能的药物，为白血病等疾病的药物研发提供细胞模型。
培养与保存
培养条件：K562 细胞一般使用 IMDM 培养基，添加 10% 的胎牛血清（FBS）和 1% 的青霉素 - 链霉素（P/S）进行培养。但对于 K562-GFP-Puro+GPC3 (h) 单克隆株，可能需要根据其特性和实验要求，对培养条件进行优化或调整，例如在筛选稳定转染细胞时，需要在培养基中添加适当浓度的嘌呤霉素。
冻存条件：通常采用含 55% 基础培养基、40% FBS 和 5% DMSO 的冻存液，将细胞冻存于液氮中。也有其他冻存液配方，如 60% 基础培养基 + 30% FBS+10% DMSO 等。
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