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K562-GFP-ffluc-GPC3(h)单克隆株
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详细内容
K562-GFP-ffluc-GPC3(h)单克隆株
产品名称 | K562-GFP-LUC-GPC3(h)单克隆细胞株说明书 |
产品货号 | XY-H2657 |
中文名称 | GPC3(h)、LUC 、GFP过表达K562单克隆细胞株 |
细胞规格 | 复苏细胞(T25细胞瓶)或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 淋巴母细胞样 |
生长特性 | 悬浮生长 |
细胞株 | (1)构建目的基因过表达慢病毒重组质粒,并包装慢病毒; |
完全培养基 | RPMI-1640 + 10% FBS + 1% P/S(选择添加) |
培养条件 | (1) 气相:95%空气,5% CO2;(2) 温度:37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液(VGA-0046-100) |
存储条件 | 液氮 |
共享方式 | 公益性共享 |

命名由来
“K562” 代表该细胞株的母细胞来源,最初是从一位患有慢性髓性白血病(CML)处于急变期的患者身上分离建立的细胞系。
“GFP” 即绿色荧光蛋白(Green Fluorescent Protein),是一种常用的报告基因,可使细胞发出绿色荧光,便于在显微镜下直接观察细胞的位置、形态和迁移等情况,也可用于检测细胞的转染效率和基因表达情况等。
“ffluc” 通常指萤火虫荧光素酶(Firefly Luciferase)基因,将其整合到细胞染色体 DNA 上,细胞可表达荧光素酶,在底物荧光素存在的条件下,催化荧光素的氧化反应产生生物发光,通过检测发光强度可以定量分析细胞的数量、活性以及基因表达水平等。
“GPC3 (h)” 指人源磷脂酰肌醇蛋白聚糖 - 3(glypican-3)基因,GPC3 是一种在多种癌症中异常表达的细胞表面蛋白,如肝细胞癌等,将其导入 K562 细胞,可用于研究 GPC3 相关的癌症生物学特性和靶向治疗等。
“单克隆株” 表示该细胞株是由单个细胞经过无性繁殖形成的细胞群体,具有遗传稳定性和均一性。
构建方法
基因载体构建:首先将 GFP 基因、ffluc 基因和 GPC3 (h) 基因分别克隆到合适的表达载体上,这些载体通常含有启动子、增强子等调控元件,以确保基因在细胞内能够高效表达。
细胞转染或感染:采用慢病毒转染等方法,将构建好的基因载体导入 K562 细胞中。慢病毒可以将目的基因整合到细胞染色体上,实现稳定表达。
筛选与鉴定:利用药物筛选、流式细胞术等方法,筛选出成功转染并稳定表达 GFP、ffluc 和 GPC3 (h) 的细胞。再通过细胞克隆技术,如有限稀释法或单细胞分选技术,获得单个细胞,经过培养扩增得到 K562-GFP-ffluc-GPC3 (h) 单克隆株。
应用领域
癌症研究:用于研究白血病、肝细胞癌等癌症的发生发展机制,例如通过观察 GFP 荧光和检测 ffluc 发光强度,研究细胞的增殖、凋亡、迁移和侵袭等生物学行为,以及 GPC3 蛋白在癌症细胞中的功能和信号通路。
药物研发:作为药物筛选的细胞模型,用于评估抗癌药物对表达 GPC3 的癌细胞的杀伤作用、药物敏感性以及药物作用机制等。还可以通过监测 ffluc 发光强度的变化,快速筛选出具有潜在疗效的药物化合物。
细胞治疗研究:在 CAR-T 细胞治疗等细胞治疗研究中,可作为靶细胞来评估 CAR-T 细胞对表达 GPC3 的癌细胞的特异性识别和杀伤效果,为细胞治疗的优化和改进提供实验依据。
培养条件
温度和二氧化碳浓度:最适生长温度为 37℃,培养时需要在 5% 的 CO2 气氛下进行,以维持细胞培养液的 pH 值稳定。
培养基:一般使用含 10%胎牛血清(FBS)和 1%双抗(100U/ml 青霉素和 100µg/ml 链霉素)的 RPMI 1640 培养基培养。
细胞密度:最适细胞密度为 1-2×106个细胞 /mL,当细胞密度达到这个范围时,需要及时进行传代培养,以避免细胞过度生长导致营养缺乏和代谢产物积累,影响细胞的生长和特性。
细胞传代:K562 细胞生长速度较快,一般每 3-4 天需要传代一次,传代比例可根据细胞密度和生长状态进行调整,通常为 1:3 至 1:5 的比例进行传代。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
热门标签:K562-GFP-ffluc-GPC3(h)单克隆株,GPC3(h),LUC,,GFP过表达K562单克隆细胞株,K562单克隆细胞株















