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HEK-293T-CRE-ffluc2+VPAC2稳转株
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详细内容
HEK-293T-CRE-ffluc2+VPAC2稳转株
产品名称 | HEK-293T-CRE-ffluc2+VPAC2 稳转株 |
产品货号 | XY-H2814 |
中文名称 | VPAC2 过表达 HEK-293T 稳转株 |
Lot number | 0051-43C7-2S⁻⁷2A2P |
细胞规格 | 复苏细胞 (T25细胞瓶) 或1 × 106 细胞冻存细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞株 构建流程 | (1)构建目的基因过表达慢病毒重组质粒,并包装慢病毒; (2)慢病毒以合适的MOI值转导靶细胞; (3)用最佳浓度药物对细胞株进行筛选,获得混合稳转株; (4)稳转株质检(COA)。 |
完全培养基 | DMEM-H + 10% FBS + 1% P/S(选择添加) |
培养条件 | (1) 气相:95%空气,5% CO2;(2) 温度:37 ℃。 |
细胞冻存 | 无血清冻存液 |
存储条件 | 液氮 |

细胞来源与背景
HEK-293T 细胞是 HEK(Human Embryonic Kidney,人胚胎肾)细胞的变种,是由 HEK293 细胞经过进一步转染 SV40(Simian Virus 40,猿猴病毒 40)大型 T 抗原后得到的稳定转染细胞系,具有高转染效率等特点,广泛应用于基因表达、蛋白生产以及病毒包装等领域。
HEK-293T-CRE-ffluc2+VPAC2 稳转株是以 HEK-293T 细胞为亲本构建的。
基因组成与功能
CRE:CRE(Cre recombinase,Cre 重组酶)基因稳定整合在细胞基因组中,Cre 重组酶可以识别特定的 DNA 序列(如 LoxP 位点)并进行基因重组,常用于基因编辑、基因表达调控等研究,可对细胞内特定基因进行敲除、插入或重组等操作。
ffluc2:通常指荧光素酶(firefly luciferase)基因的某种变体。荧光素酶是一种报告基因,可催化荧光素与氧气发生反应产生荧光。在细胞中表达 ffluc2 基因后,可以通过检测荧光强度来反映基因的表达水平、细胞的活性、信号通路的激活情况等,常用于生物发光检测实验。
VPAC2:VPAC2(Vasoactive Intestinal Peptide Receptor 2,血管活性肠肽受体 2)基因在该稳转株中稳定表达。VPAC2 是一种 G 蛋白偶联受体,可与血管活性肠肽等配体结合,参与调节多种生理过程,如细胞增殖、分化、代谢以及神经调节等。在细胞水平的研究中,可用于探讨相关信号通路的机制、筛选与 VPAC2 相关的药物(如激动剂、拮抗剂)等。
构建方法
一般可通过慢病毒转染等方法将包含 CRE、ffluc2 和 VPAC2 基因的表达载体导入 HEK-293T 细胞,然后利用抗生素筛选等手段,筛选出稳定整合并表达这些基因的细胞克隆,从而获得 HEK-293T-CRE-ffluc2+VPAC2 稳转株。慢病毒转染法因转染效率高且能稳定整合到基因组中,常用于稳转株的构建。
应用领域
基因功能研究:利用 CRE 重组酶的特性可研究特定基因在细胞中的功能;通过 ffluc2 报告基因可监测基因表达变化等,进而分析基因之间的相互作用以及对细胞生理功能的影响。
信号通路研究:VPAC2 相关信号通路的研究,如探讨 VPAC2 激活或抑制后对细胞内信号传导途径的影响,以及与其他信号通路的交互作用等。
药物筛选:可用于筛选针对 VPAC2 的药物,通过观察药物作用下 ffluc2 报告基因的表达变化或细胞的表型改变,判断药物的活性、效力等;也可研究药物对 CRE 介导的基因重组等过程的影响。
细胞生物学研究:作为一种特殊的细胞模型,用于研究细胞的增殖、分化、凋亡等过程中相关基因和信号通路的调控机制。
培养条件
通常需要在适宜的细胞培养基中培养,如 DMEM 培养基,并添加 10% 胎牛血清(FBS)、1% 青霉素 - 链霉素等,同时根据需要可能还会添加与筛选稳转株相关的抗生素(如嘌呤霉素等,具体取决于构建过程中使用的抗性基因),培养环境为 37°C、5%CO2 。但具体的培养条件可能因实验需求和实验室习惯而略有差异。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。
以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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