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切片一氧化氮检测试剂盒(NO检测试剂盒)-红色荧光
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详细内容
切片一氧化氮检测试剂盒(NO检测试剂盒)-红色荧光
产品货号:XY9-460832
产品规格及价格:100T/1600元;200T/2700元
产品简介:
组织切片一氧化氮(NO)检测试剂盒是一种利用NO特异性荧光探针O38进行NO检测的试剂盒。
O38是一种细胞膜通透性的荧光探针,本身荧光较弱,被NO特异性氧化生成红色荧光物质,红色荧光强度与NO水平成正比,检测红色荧光就可以知道组织内NO的水平。
在激发波长516 nm,发射波长606 nm附近,使用荧光显微镜/激光共聚焦检测红色荧光,从而测定样本内NO水平。利用本试剂盒可以快速定性检测样本内一氧化氮(NO)水平变化差异。
活性氧(Reactive oxygen species, ROS) 包括过氧化氢(H2O2,Hydrogen peroxide)、羟基自由基(•OH,Hydroxyl radical)、单线态氧(1O2,Singlet oxygen)、一氧化氮(NO,Nitric oxide)、超氧阴离子(•O2-,Superoxide anion)、过氧化自由基(ROO• ,Peroxyl radical)、过氧羟自由基(HOO• ,hydroperoxyl)及其下游产物过氧化物过氧亚硝基阴离子(ONOO-,Peroxynitrite anion)、ClO-和羟化物等,参与细胞生长增殖、发育分化、衰老和凋亡以及许多生理和病理过程。
活性氧(reactive oxygen species,ROS)的产生主要是氧化磷酸化的结果,在呼吸链中,在某些位点会有“泄露”的电子直接和氧气或和其他电子受体反应,在酶或非酶作用下引发一系列反应生成不同种类的活性氧:“泄露”的电子最初和氧气反应生成超氧阴离子自由基(O2•-)(图1A)。超氧阴离子遇水生成H2O2(图1B),同时过氧化氢也可由氧气在单胺氧化酶(monoamine oxidase,MAO)的作用下生成(图1C),生成的过氧化氢在髓过氧化物酶(myeloperoxidase, MPO)的催化下与Cl-反应可生成ClO-(图1D),在铁或铜离子的催化下发生Fenton反应生成OH•(图1E),超氧阴离子遇氮氧化物反应生成ONOO-(图1F)。这些生成的高氧化活性的物质统称为活性氧。
一般使用新鲜样本振动切片或者冰冻切片检测NO。石蜡切片样本的NO在蜡块的制作过程中会损失掉,不建议使用石蜡切片样本。已经制备好的石蜡切片样本中残余的NO也可以用本试剂盒检测。
有条件的话也可以采用直接用组织样本检测,不需要制备成切片的NO检测试剂盒(相关产品:BB-460732)。
除了红色荧光的NO检测试剂盒,也可以提供绿色、蓝色、深红色等其它颜色的检测试剂盒。
还可以为您提供各种组织、细胞样本、切片样本的活性氧、活性氮等各种颜色的检测试剂盒产品。
可以提供各种细胞检测试剂盒。包括细胞凋亡、增殖、毒性、活性氧、细胞代谢、氧化应激、细胞膜流动性、膜通透性转换孔、细胞耗氧率、细胞内pH、细胞粘附、细胞自噬等数百种检测试剂盒产品。
可以为您提供各种颜色的BBcellProbe® M系列、N系列、L系列、E系列、G系列等细胞膜、细胞质、细胞核、溶酶体、线粒体、内质网、高尔基体、骨架、微管等细胞、细胞亚结构荧光染色试剂盒产品,以及钙离子、钠离子、氩离子等各种荧光染色试剂盒产品。
可以提供动物、植物、微生物、酵母、水产、家禽、兽类、土壤等样本的各种生化指标检测的数百种试剂盒产品。
产品特点:
1.使用方便:可用荧光显微镜直接观察;
2.背景低,灵敏度高;
3.线性范围宽,使用方便。

使用方法:
1.螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体收集至管底,避免开盖时液体洒落。
2.尽量缩短探针标记后到测定所用的时间,以减少各种可能的误差。
3.对于某些样本,如果荧光太强,可以按照 1:200-1:1000 稀释探针。探针标记的时间也可以根据情况在 20-60分钟内适当进行调整。
4.冰冻切片制作不需要经过固定脱水包埋等步骤,直接冷冻后切片贴片。
5.有条件也可以采用振动切片的方法。有些方便处理的样品类型也可以采用徒手切片。
6.以下操作步骤仅供参考,请根据实际样本情况调整。
试剂配制
1. 根据样本数,用纯水将O38 一氧化氮荧光探针 200-1000 倍稀释,配成染色工作液。
2. 用纯水将 10X 清洗液 10 倍稀释,配成 1X 清洗液工作液。
探针标记
1. 准备待测的厚为 10 µm 的未经固定处理的冰冻切片。
2. 室温下,小心加上 200 µl 清洗液工作液,铺满整个切片表面,静置 5-10 分钟。
3. 小心吸除清洗液。
4. 滴加 100-200 µl 染色工作液,在 37℃培养箱避光孵育 20-45 分钟。
5. 移除染色液。
6. 用 PBS 洗涤切片 2-3 次。
7. 加盖玻片或甘油封片。
8. 荧光显微镜检测。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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