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线粒体膜电位检测试剂盒(DiOC6(3)法)
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详细内容
线粒体膜电位检测试剂盒(DiOC6(3)法)
产品货号:XY9-41055
产品规格及价格:50T/1400元;100T/2500元
产品简介:
线粒体膜电位的下降是细胞凋亡早期的一个标志性事件。DiOC6(3)是一种可以通透细胞膜的选择性染色活细胞线粒体的荧光染料,可以用作检测线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential)的荧光探针。
DiOC6(3)是亲脂性荧光染料,其在水溶液中时荧光较弱,与脂质结合后荧光大幅度增强。在正常细胞中能够依赖线粒体跨膜电位进入线粒体内膜。在细胞凋亡发生时,线粒体膜完整性破坏,线粒体膜通透性转运孔开放,引起线粒体跨膜电位(ΔΨm) 的崩溃,DiOC6(3)重新释放出线粒体膜。通过荧光信号的强弱来检测线粒体膜电位的变化。
本试剂盒可用于培养的细胞或从组织中提取出的线粒体的膜电位检测。
DiOC6(3)可以快速通过细胞膜,仅需几分钟就可以被具有活性的线粒体所俘获,并且对细胞没有任何毒性。DiOC6(3)的最大激发波长为482nm,最大发射波长为500nm。在荧光显微镜下观察,呈现黄绿色荧光。
可以提供各种细胞检测试剂盒。包括细胞凋亡、增殖、毒性、活性氧、细胞代谢、氧化应激、细胞膜流动性、膜通透性转换孔、细胞耗氧率、细胞内pH、细胞粘附、细胞自噬等数百种检测试剂盒产品。
产品应用:
1.流式细胞仪
2.激光共聚焦
3.荧光显微镜

使用方法:
1.螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体收集至管底,避免开盖时液体洒落。
2.细胞处理需要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。
3.始终保持平衡染液中 pH 值的一致性,因为 pH 值的变化将影响膜电位。
4.根椐细胞种类、实验条件不同流式细胞仪设置不同。
悬浮细胞
1. 试剂配制:
根据样本数量,用 37℃培养箱预热染料稀释液试剂 B 将 DiOC6(3)荧光染料 10 倍稀释。再用 HBSS 或相应的无血清培养基或其他缓冲液将探针 DiOC6(3)进行 25000 倍稀释,配制成染色工作液。
2. 收集样本细胞以及阴性、阳性对照细胞。
3. 用 PBS 洗涤细胞两次。离心收集细胞。
4. 用 500 µl DiOC6(3)染色工作液将细胞重悬,细胞密度约 5-10X105 个/ml。37℃,5% CO2 的培养箱中孵育15-30 分钟。
5. 常温离心收集细胞。 用 PBS 洗涤细胞 2 次。
6. 用 500 µl 预热的 HBSS 或 PBS 缓冲液将细胞重悬。
7. 用流式细胞仪或荧光酶标仪/分光光度计检测分析结果,或者用荧光显微镜或激光共聚焦显微镜观察结果。
贴壁细胞
对于贴壁细胞,可以先收集细胞,重悬后参考悬浮细胞的检测方法。
纯化线粒体
1. 把配制好的 DIOC6(3) 染色工作液再用 DIOC6(3)孵育缓冲液(1×)稀释 5 倍。
2. 0.9mL 5 倍稀释的 DIOC6(3) 染色工作液中加入 0.1mL 总蛋白量为 10~100 µg 的纯化的线粒体。
3. 结果检测。
组织样本
组织样本可以用玻璃匀浆器匀浆成单细胞悬液后按照细胞样本的方法检测。也可以用其他细胞悬液制备的试剂盒处理组织后检测。
结果分析 :
检测时可以把激发光设置为 488nm,发射光设置为 500nm。
线粒体膜电位降低,荧光强度减弱。
用流式细胞仪检测细胞线粒体膜电位的情况。
也可以用荧光显微镜或激光共聚焦显微镜观察;用荧光分光光度计或荧光酶标仪检测。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
热门标签:线粒体膜电位,DiOC6(3)法,线粒体膜电位检测试剂盒(DiOC6(3)法)















