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一氧化氮检测试剂盒-化学法,Griess法
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详细内容
一氧化氮检测试剂盒-化学法,Griess法
产品货号:XY9-47016
产品规格及价格:50T/900元
产品简介:
一氧化氮(Nitric Oxide,NO),是一种非常重要的生理性的细胞内及细胞间的信号分子,在免疫、神经及循环等系统中起着重要作用。一氧化氮化学性质活泼,体内代谢转化为硝酸盐(NO3-)和亚硝酸盐(NO2-),此两种浓度之和(NO3-+NO2-)才能准确代表NO水平。
一氧化氮(NO)检测试剂盒利用NO 在体内或水溶液中极易氧化生成NO2—,在酸性条件下,NO2—与重氮盐磺酸胺生成重氮化合物,进一步与萘基乙烯基二胺偶合,产物在550nm 处有特征吸收峰,测定其吸光值,可以计算NO 含量。
本试剂盒检测方法准确性高、灵敏、简便且较稳定,可用于血清、组织匀浆、细胞及细胞培养液等样本的NO浓度测定。
还可以提供细胞内NO检测试剂盒,可以用荧光法快速检测,准确性、灵敏度更高,可以进行原位检测和高通量检测。
可以提供各种细胞检测试剂盒。包括细胞凋亡、增殖、毒性、活性氧、细胞代谢、氧化应激、细胞膜流动性、膜通透性转换孔、细胞耗氧率、细胞内pH、细胞粘附、细胞自噬等数百种检测试剂盒产品。
可以为您提供各种颜色的 M系列、N系列、L系列、E系列、G系列等细胞膜、细胞质、细胞核、溶酶体、线粒体、内质网、高尔基体、骨架、微管等细胞、细胞亚结构荧光染色试剂盒产品,以及钙离子、钠离子、氩离子等各种荧光染色试剂盒产品。
可以提供动物、植物、微生物、酵母、水产、家禽、兽类、土壤等样本的各种生化指标检测的数百种试剂盒产品。

使用方法:
1.因组织中 NO 含量较少,组织匀浆一般为 10%或 20%,且做好的组织匀浆离心速度为 2500rpm/min,离心10 分钟,转速不可过高,时间不可太长,样本取样量以 0.3-0.5ml 为宜。
2.血清、血浆、组织等样本应新鲜,或者于-80℃以下保存半年以内检测。
3.所有实验用水均需使用不含 NO2-的纯水或双蒸水。
4.样本与底物反应完毕后,离心,取上清时千万不可将沉淀吸出,否者影响结果。
5.需使用一次性塑料试管,若没有,使用较新的玻璃管并洗刷干净。
一、试剂配制
1. 试剂 B 的准备:试剂 B 使用之前震荡溶解;
2. 试剂 C 的准备:试剂 C 使用之前 60℃加热震荡 15min;
二、样本的处理:
1. 组织:
按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,加入 1mL 提取液 A)进行冰浴匀浆。10000g,4℃离心 15min,取上清,置冰上待测。
2. 细菌、真菌:
按照细胞数量(104 个):提取液体积(mL)为 500~1000:1 的比例(建议 500 万细胞加入 1mL 提取液A),冰浴超声波破碎细胞(功率 300w,超声 3 秒,间隔 7 秒,总时间 3min);然后 10000g,4℃,离心15min,取上清置于冰上待测。
3. 体液和培养液等其它液态样品:直接测定。
三、操作步骤:
1. 操作表:
四、NO 含量计算
标准曲线回归方程为:y= 0.016x -0.0103,R2= 0. 9986
1、组织样品:
(1)按样本质量计算
NO 含量 =(ΔA +0.0103)÷0.016×V 反总÷(V 样÷V 样总×W)×10-3(µmoL/g 鲜重)= 0.14×(ΔA +0.0103)÷W
(2)按样本蛋白浓度计算
NO 含量 =(ΔA +0.0103)÷0.016×V 反总÷(V 样×Cpr)×10-3(µmoL/mg prot)= 0.14×(ΔA +0.0103)÷Cpr
2、细胞:
NO 含量 =(ΔA +0.0103)÷0.016×V 反总÷(V 样÷V 样总×细胞数量)×10-3(µmol/104 cell)= 0.14×(ΔA +0.0103)÷细胞数量(万个)
3、其他样品:
NO 含量 =(ΔA +0.0103)÷0.016×V 反总÷V 样(µmoL/L)= 140×(ΔA +0.0103)
V 反总:反应总体积,0.9mL;
V 样:反应中样品体积,0.4mL;
V 样总:加入提取液体积,1mL;
W:样品质量,g;
Cpr:蛋白浓度,mg/mL
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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