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超氧化物歧化酶（SOD）检测试剂盒（总）
价格：￥ 100T/900元
品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/15 11:06:33
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详细内容
超氧化物歧化酶（SOD）检测试剂盒（总）
产品货号：XY9-47103
产品规格及价格：100T/900元
产品简介：
超氧化物岐化酶(Superoxide Dismutase, SOD)是含金属辅基的酶，能催化超氧化物阴离子发生岐化作用，生成过氧化氢(H2O2)和氧气(O2)，是生物体内一种重要的抗氧化酶。由于超氧自由基是不稳定的的自由基，寿命极短，SOD活性一般用间接方法测定，并利用各种呈色反应来测定SOD活力，其中显色剂有NBT(四氮唑蓝)、WST-1、WST-8等。
总超氧化物歧化酶(SOD)检测试剂盒(NBT核黄素微板法)(Total Superoxide Dismutase Assay Kit with NBT)是一种基于NBT的显色反应，通过比色来检测组织、细胞、植物、血清或其它样品中SOD即超氧化物歧化酶活性的试剂盒，其检测原理是利用SOD抑制NBT在光照下的还原作用来确定酶活性大小，在有氧化合物存在的情况核黄素被光还原，后经一系列的反应可将NBT还原为蓝色的甲臜(ｆormazan)，后者在560nm处有强吸收，SOD可清除超氧阴离子(O2.-)，从而抑制了甲臜的形成，反应液蓝色愈深说明超氧化物岐化酶活性愈低，反之则酶活性愈高，据此通过酶标仪比色分析就可以计算出超氧化物岐化酶活性水平。
本试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。
可以提供各种细胞检测试剂盒。包括细胞凋亡、活性、增殖、毒性、活性氧、周期、细胞代谢、氧化应激、膜流动性、膜电位、膜通透性转换孔、细胞耗氧率、胞外酸化、细胞内pH、细胞粘附、细胞自噬等数百种细胞检测试剂盒产品。
产品应用：
微孔板，酶标仪
使用方法：
1.试剂盒中的低温试剂避免反复冻融，以免失效或效率下降。
2.待测样品⁻⁷0℃可保存 1 个月，需注意反复冻融会导致 SOD 部分失活。
3.细胞或组织等样品制备时，不能采用含有 Triton X-100 等去垢剂的溶液，否则会干扰本试剂盒的检测。
4.抗氧化物会对本试剂盒的检测产生干扰，例如 0.1mM ascorbic acid，5mM GSH 都会使测定出来的吸光度显著升高。
5.对于植物样品，研磨处理应迅速，以免 SOD 酶活下降，尽量处于冰浴状态处理。
6.如果无 4000Lx 日光，可 200W 在 10~12cm 处垂直照射 20min；在超净工作台 5cm 垂直照射 30min 左右；在强太阳光下垂直照射 30min 左右。
7.一般要求各孔受光情况一致，所有反应管应排列在与日光灯管平行的直线上。
8.反应温度控制在 25℃，视酶活性高低适当调整反应时间；温度较高时，光照时间应缩短；温度较低时，光照时间相应延长。
9.所用离心管或 96 孔板应洁净透明，透光性好。
10.如果配制的 NBT 酶工作液出现淡黄色沉淀或絮状物应弃用，否则效果不佳。
11.如果用分光光度计，比色杯光径应为 1cm，加入的上清量应根据比色杯的最小量程而定。
一、样本的前处理：
1.血浆或含红细胞的样品：
从待测样品中分理出的血清或血浆不应有溶血，如果含有应去除红细胞后检测，如超过检测范围，用 SOD 提取液稀释后检测。
血清去除红细胞的简易方法如下：
用抗凝管收集血液，颠倒混匀，取至少 500µl 全血，4 3000g ℃ 离心 5min，转移上清至另一新的 1ml 离心管中，适量生理盐水稀释后待测，亦可采用红细胞裂解液去除红细胞
2、组织样品：
动物用含有 20U/ml Heparin 的生理盐水(0.9% NaCl containing 20U/ml Heparin)灌流清除血液后获取组织样品，按照每 100mg 组织加入 500µl SOD 提取液的比例，用玻璃匀浆器在 4℃或冰浴匀浆，4 4000g ℃ 离心 0min，取上清液(SOD 粗提液)用于酶活性的测定。
3、细胞样品：
对于贴壁细胞，由于后续用于酶活性的测定，避免使用胰酶消化细胞，可以使用细胞刮或 EDTA 处理细胞并收集细胞，细胞用无菌的 PBS 或生理盐水洗涤 1 次，按照每 106 细胞加入 300~500µl SOD 提取液的比例，用玻璃匀浆器在 4℃或冰浴匀浆，4 10000g ℃ 离心 10min，取上清液(SOD 粗提液)用于酶活性的测定。
4、植物样品：
准确称取植物材料(果肉或者去叶脉的叶片)0.4g，剪碎，置于 4℃预冷的研钵或匀浆器中，加入预冷提取液1ml，低温研磨至匀浆后转移至离心管，用 3ml 提取液冲洗研钵或匀浆器并转入离心管，加提取液至总体积为 4ml，4 10000r/min ℃ 离心 20min，上清液为酶提取液，上清液可用于 SOD 的检测。
注意：如果 SOD 酶活性较低，应相应减少提取液的总体积，以便提高 SOD 酶的浓度。
5、上述样品准备完毕后可以用 BCA 法测定蛋白浓度，通常 10~20µg 蛋白的细胞或组织匀浆液样品其中的SOD 平均活力约 1 个活力单位(不同细胞和组织的差异会比较大，该活力范围仅作为初步的参考)。
每种样品准备 20~100µg 蛋白量通常已经足够用于后续检测，根据蛋白浓度和预计的蛋白使用量，用本试剂盒提供的 SOD 提取液适当稀释样品，例如小鼠肝脏组织 10%匀浆液(组织和匀浆液的重量比为 10%)上清，通常需要稀释 10~100 倍，准备好的样品如果当天测定，可以冰浴保存；如果当天不能完成测定，可以-20℃冻存，但建议尽量当天完成测定。
二、NBT 酶工作液
按照每个反应 160µl 的体积，均匀混合 100µl SOD 提取液、30µl NBT 显色液、30µl 酶溶液，即可配置成
160µl NBT 酶工作液；根据待检测样品(包括标准品)的数量，配置适量的 NBT 酶工作液。
具体配置方法可以参考下表，配制好的 NBT 酶工作液 4℃或冰浴保存，可以在当天使用，但建议尽量现配现用。
注意：由于酶溶液的用量较少且易沉降，必须注意在使用前先轻轻离心一下，然后适当混匀后再使用。
三、(选做)准备 SOD 标准品：需自备 SOD 标准品，用本试剂盒提供的 SOD 提取液将 SOD 标准品稀释至如下系列浓度：200、100、50、20、10、5、2U/ml，各取 20µl 参考样品进行检测。
注意：
为避免稀释后 SOD 酶活性的下降， SOD 标准品宜现稀释现使用，本试剂盒对于 SOD 的检测并不需要 SOD作为标准品，但可使用 SOD 标准品作为阳性对照或作为对 SOD 活性定量的参考。
四、SOD 加样
参考下表使用 96 孔板设置空白对照孔、光照对照孔、样品孔，并按下表依次加入待测样品和其它各种溶液，加入反应启动工作液后充分混匀。
注意：加入反应启动工作液后反应即会开始，可以在低温操作或用排枪操作以减小各孔间因加入反应启动工
作液的时间先后差异而导致的误差。
五、SOD 测定：
混匀，取空白对照孔置于暗处，其他各孔置于 4000Lx 日光下反应 20min，各孔受光情况应一致，温度高时时间缩短，低时延长；反应结束后，以不照光的空白对照孔调零，用酶标仪测定 560nm 处吸光度。
六、计算：
SOD 活力单位的定义：以抑制 NBT 光化还原的 50%为一个酶活性单位(U)。
液体中总 SOD 活力(U/ml)=(A 光照－A 样品)/(50%×A 光照×VT)
组织、细胞匀浆液中总 SOD 活力(U/g)=(A 光照－A 样品)×V/(50%×A 光照×VT×W)
血液中总 SOD 活力(U/gHb)
=(A 光照－A 样品)×V×C/(50%×A 光照×VT×Hb)式中：A 光照=光照对照孔的吸光度
A 样品=样品孔的吸光度
V=样品液总体积(ml)
VT=测定时样品所用体积(ml)
W=样品鲜质量(g)
C=1ml/采血量(ml)
Hb=血红蛋白含量(gHb/ml)
仅用于科研，不能用于临床诊断！所有产品仅供科研使用，不得用于人或动物的治疗等任何其他用途，不为任何个人提供产品和服务。以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。
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