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谷胱甘肽-过氧化物酶（GSH-PX）检测试剂盒
价格：￥ 100T/950元
品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/15 11:06:33
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详细内容
谷胱甘肽-过氧化物酶（GSH-PX）检测试剂盒
产品货号：XY9-4712
产品规格及价格：100T/950元
产品简介：
谷胱甘肽过氧化物酶（Glutathione peroxidase，GSH-PX）是机体内广泛存在的一种重要的催化过氧化氢分解的酶。它特异的催化还原型谷胱甘肽（GSH）对过氧化氢的还原反应，可以起到保护细胞膜结构和功能的完整的作用。GSH-PX的活性中心是硒半胱氨酸，硒是GSH-PX的必须部分，每克分子酶含4克原子硒。测定GSH-PX的活力可以作为衡量机体硒水平的一项生化指标。
谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）可以促进过氧化氢还原型谷胱甘肽(GSH)反应生成水及氧化型谷胱甘肽(GSSG),谷胱甘肽过氧化物酶的活力可用其酶促反应的速度来表示，测定此酶促反应中还原型谷胱甘肽的消耗，则可求出酶的活力。
GSH-PX的活力以催化GSH的反应速度来表示，由于这二个底物在没有酶的条件下，也能进行氧化还原反应（称非酶促反应），所以计算次酶活力时必须扣除非酶促反应所
引起的GSH减少的部分。
GSH量的测定：GSH的二硫代二硝基苯甲酸作用生成5-硫代二硝基苯甲酸阴离子呈现较稳定的黄色，在412nm处测其吸光度即可计算出GSH的量。
本试剂盒仅用于科研领域，不可用于临床诊断或其他用途。
产品应用：
分光光度计
使用方法：
1.旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。
2.空白管、标准管一般只需做 1-2 只
3.在正式实验前务必做预实验摸索最佳取样浓度。最佳取样量及最佳取样浓度因样品种类不同，其 GSH-PX活力不一。根据酶的百分抑制率与酶的活力呈抛物线关系，各种测定样品取样量及取样浓度不一样，在每测定一种新的样品前选择一个最佳取样量及最佳取样浓度；
4.溶血液在室温 1 小时内活力不变，建议样品稀释后不超过 1 小时测试。
5.血样要新鲜。肝素抗凝后放冰箱不超过 48 小时。
6.试剂 A 的瓶子要洗干净，工作液现用现配。
7.GSH 标准品要现用现配。
8.37℃水浴反应时间 5 分钟要准确。
9.测定上清液当天提取，当天测定；
一、样本制备：
血清、血浆样本： 按常规方法制备，可以直接用于本试剂盒的测定，-20℃冻存。
二、试剂的配制
GSH 工作液的配制：
全血 GSH-PX 活力测定
1、样本处理
溶血液配制：
⑴ 取肝素抗凝全血 20ul，用蒸馏水稀释至 1ml，配成 1:49 的溶血液；
鼠血 10ul，用蒸馏水稀释至 1ml，配成 1:99 的溶血液。
⑵ 充分混匀，放置 5 分钟直至玻璃管中的溶血液对光呈完全透明状，方可进行检测。
⑶ 配好的溶血液中 GSH-PX 活力只能保持 45 分钟-60 分钟，室温较低时可延长至 120 分钟。抗凝全血可在 2-8℃保存 2-3 天。
注：1、测溶血液中 GSH-PX 含量要注意样品测试前红细胞一定要充分溶血。
2、正式实验前请先取 1~2 个样本做预实验；
2、GSH-PX 酶活力测定：
⑴ 酶促反应：（注：试剂 A 工作液提前在 37℃预温）
⑵ 显色反应：按下列配方和步骤进行
3、全血中 GSH-PX 的活力的计算：
⑴ 定义：每 4ul 全血在 37℃反应 5 分钟，扣除非酶促反应的作用，使反应体系中 GSH 浓度降低 1umol/L 为一个酶活力单位。
⑵ 计算：
非酶管 OD-酶管 OD 1+X
GSH-PX 酶活力= X 标准液浓度（20umol/L）X 稀释倍数（5X ）
标准管 OD-空白管 OD 1+49
注： 5：从酶促反应表中反应液 0.5ml 加试剂 B2ml，在反应液中为 5 倍稀释，所以乘 5.
X：为全血稀释比例，例如 1:99 稀释，X 为 99
1+49：溶血液为 1:49 稀释时，取 0.2ml 检测即等同于取样量为 4ul 的全血。
4、溶血液的最佳取样浓度及最佳取样量的摸索举例；
1.样本来源：正常组新鲜大鼠尾部全血；
2.样本前处理：分别用蒸馏水将大鼠全血按 1：24、1:49、1:59、1:69、1:79、1:89、1:99、1:149、1:199 的比例稀释成一系列不同浓度的溶血液，分别取一系列不同浓度溶血液 0.2ml 按全血的测定操作表进行检测。
5、计算举例：
A: 取 1:49 溶血液 0.2ml 进行测定，测得非酶管 OD 值 0.463，酶管 OD 值为 0.228，标准管 OD 值为
0.165，空白管 OD 值 0.041，酶活力=（0.463-0.228）/ (0.165-0.041) X 20 X 5 X 50/50 =189.52 酶活力单位 B: 取 1:149 溶血液 0.2ml 进行测定，测得非酶管 OD 值 0.451，酶管 OD 值为 0.205，标准管 OD 值为0.165，空白管 OD 值 0.041，酶活力=（0.451-0.205）/ (0.165-0.041) X 20 X 5 X 150/50 =595.16 酶活力单位组织、线粒体、细胞膜 GSH-PX 活力测定
1、样本处理
10%组织匀浆的制备：
⑴ 取组织块 200mg-1g，用冷生理盐水漂洗，除去血液，滤纸拭干，称重，放入 5-10ml 的小烧杯内。
⑵ 用量筒量取 9 倍重量的预冷的匀浆介质（pH7.4,0.01mol/L 蔗糖，0.01mol/L Tris-HCl，0.0001mol/L EDTA2Na 溶液）或生理盐水。用移液器将总量 2/3 的匀浆介质或生理盐水移入烧杯。用眼科小剪刀尽快剪
组织块（天热时小烧杯要放入冰水中）；
⑶ 将剪碎的组织倒入玻璃匀浆管中，再将剩余的 1/3 的匀浆介质或生理盐水用来冲洗残余在小烧杯中的碎组织一起倒入玻璃匀浆管中进行匀浆（6-8 分钟）。充分磨碎，使组织匀浆化；也可使用组织捣碎机 10000-
15000r/min，研磨制成 10%组织匀浆；
⑷ 将制备好的 10%匀浆 3000r/min 离心 10-15 分钟，取上清。
线粒体的制备：
取 10%组织匀浆 5-10ml，以 1000-2000r/min 离心 10 分钟，取上清，8000-10000r/min 离心 15 分钟，沉淀为线粒体。
2、GSH-PX 酶活力测定：
⑴ 酶促反应：（注：试剂 A 工作液提前在 37℃预温）
⑵ 显色反应：按下列配方和步骤进行
↓ 混匀。室温静置 15 分钟，412nm 处，1cm 光径比色杯，蒸馏水调零，测各 OD 值。
3、组织中 GSH-PX 的活力的计算：
⑴ 定义：每 mg 蛋白质，扣除非酶促反应的作用，使反应体系中 GSH 浓度降低 1umol/L 为一个酶活力单位。
⑵ 计算：
非酶管 OD-酶管 OD
GSH-PX 酶活力= X 标准液浓度（20umol/L）X 稀释倍数（5）÷反应时间
标准管 OD-空白管 OD
÷(取样量 X 样本蛋白浓度)
注： 1.从酶促反应表中反应液 0.5ml 加试剂 B2ml，在反应液中为 5 倍稀释，所以乘 5.
2.组织蛋白的测定：可以用 BCA 或 Bradford 蛋白定量试剂盒进行蛋白浓度测定；
4、组织匀浆的最佳取样浓度及最佳取样量的摸索举例；
（1）样本来源：正常组小鼠肝组织，制备成 10%肝匀浆上清，用生理盐水稀释成 1%，待测；
（2）样本前处理：分别用生理盐水将 1%肝匀浆稀释成
1.0%、0.5%、0.4%、0.3%、0.25%、0.2%、0.1%、0.05%一系列不同浓度的组织匀浆，分别取一系列不同浓度组织匀浆 0.2ml 按组织的测定操作表进行检
5、计算举例：
取 0.25%小鼠肝组织匀浆 0.2ml 进行测定，测得非酶管 OD 值 0.480，酶管 OD 值为 0.172，标准管 OD
值为 0.163，空白管 OD 值 0.041，1%匀浆蛋白浓度 0.910mg/ml，
酶活力=（0.480-0.172）/ (0.163-0.041) X 20 X 5 ÷（0.910÷4*0.2）=1109.71 酶活力单位
测酶活力用 0.25%匀浆，蛋白定量用 1%匀浆，所以除以 4.血清、血浆 GSH-PX 活力测定
1、GSH-PX 酶活力测定：
⑴ 酶促反应：（注：试剂 A 工作液提前在 37℃预温）
⑵ 显色反应：按下列配方和步骤进行
2、血清中 GSH-PX 的活力的计算：
⑴ 定义：每 0.1ml 血清在 37℃反应 5 分钟，扣除非酶促反应的作用，使反应体系中 GSH 浓度降低 1umol/L 为一个酶活力单位。
⑵ 计算：
非酶管 OD-酶管 OD
GSH-PX 酶活力= X 标准液浓度（20umol/L）X 稀释倍数（6）
标准管 OD-空白管 OD
X 测试前稀释倍数
注： 从酶促反应表中反应液 0.4ml 加试剂 B2ml，在反应液中为 6 倍稀释，所以乘 6.
4、血清（浆）的最佳取样浓度及最佳取样量的摸索举例；
（1）样本来源：正常组大鼠眼眶取全血，肝素钠抗凝取血浆；
（2）样本前处理：分别用生理盐水将血浆按 1:1、1:4、1:7、1:9、1:14、1:19 一系列不同浓度的血浆，分别取一系列不同浓度血浆 0.1ml 按血清（浆）的测定操作表进行检
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