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单线态氧检测试剂盒（1O2检测试剂盒）（绿色荧光）
价格：￥ 100T/1600元；200T/2700元
品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/19 10:46:00
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详细内容
单线态氧检测试剂盒（1O2检测试剂盒）（绿色荧光）
产品货号：XY9-46066
产品规格及价格：100T/1600元；200T/2700元
产品简介：
单线态氧（1O2）检测试剂盒是一种利用荧光探针 O66进行单线态氧检测的试剂盒。O66可以自由穿过细胞膜，进入细胞内后，在单线态氧存在的条件下，O66探针被氧化生成荧光物质O66F，O66F的绿色荧光强度与细胞内单线态氧水平成正比，检测O66F绿色荧光强度就可以知道细胞内单线态氧的水平。
在激发波长516 nm，发射波长606 nm附近，使用荧光酶标仪、荧光分光光度计、流式细胞仪、荧光显微镜、激光共聚焦显微镜等检测O66F 荧光强度，从而测定细胞内单线态氧水平。
O66荧光探针对单线态氧（1O2）有较高的选择性，但是也会与活性羟基有反应。
单线态氧（1O2，Singlet oxygen）是活性氧家族的一员，活性氧(Reactive oxygen species, ROS) 包括过氧化氢（H2O2，Hydrogen peroxide）、羟基自由基（•OH，Hydroxyl radical）、单线态氧（1O2，Singlet oxygen）、一氧化氮（NO，Nitric oxide）、超氧阴离子(•O2-，Superoxide anion)、过氧化自由基(ROO• ，Peroxyl radical)、过氧羟自由基（HOO• ，hydroperoxyl）及其下游产物过氧化物单线态氧（1O2，Peroxynitrite anion）、ClO-和羟化物等，参与细胞生长增殖、发育分化、衰老和凋亡以及许多生理和病理过程。
活性氧(reactive oxygen species,ROS)的产生主要是氧化磷酸化的结果，在呼吸链中，在某些位点会有“泄露”的电子直接和氧气或和其他电子受体反应，在酶或非酶作用下引发一系列反应生成不同种类的活性氧：“泄露”的电子最初和氧气反应生成超氧阴离子自由基(O2•-)(图1A)。超氧阴离子遇水生成H2O2(图1B)，同时过氧化氢也可由氧气在单胺氧化酶(monoamine oxidase,MAO)的作用下生成(图1C)，生成的过氧化氢在髓过氧化物酶(myeloperoxidase, MPO)的催化下与Cl-反应可生成ClO-(图1D)，在铁或铜离子的催化下发生Fenton反应生成OH•(图1E)，超氧阴离子遇氮氧化物反应生成ONOO-(图1F)。这些生成的高氧化活性的物质统称为活性氧。
本试剂盒可以用于各种真核培养细胞的检测。
O系列活性氧探针具有多种颜色可以选择，可根据情况对样品进行多色标记实验。除了本试剂盒的绿色荧光探针， 还可以提供红色、蓝色、深红色荧光的活性氧检测试剂盒。
可以为您提供各种细胞样本、切片样本、组织样本的活性氧、活性氮检测试剂盒产品。
产品特点：
1.使用方便：可用激光共聚焦显微镜直接观察、荧光分光光度计、荧光酶标仪或流式细胞仪检测；
2.背景低，灵敏度高；
3.线性范围宽，使用方便。
使用方法：
1.螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体收集至管底，避免开盖时液体洒落。
2.荧光探针标记后，一定要洗净残余的未进入细胞内的探针，否则会导致背景较高。
3.探针标记完毕并洗净残余探针后，可以进行激发波长的扫描和发射波长的扫描，以确认探针的标记情况是否正常。
4.尽量缩短探针标记后到测定所用的时间，以减少各种可能的误差。
5.原位检测必须使用荧光检测专用的黑色透明底 96 孔细胞培养板。
6.以下操作步骤仅供参考，请根据实际样本情况调整或参考文献。
探针染色工作液配制：
1. 根据样本数量，用 HBSS 将 O66 荧光染料 500-1000 倍稀释，配制成染色工作液。
细胞探针标记
对于贴壁细胞，可以进行原位标记
1. 培养皿/培养板准备细胞样本。
2. 待细胞生长到合适丰度，吸除培养液，用 PBS 洗涤细胞。
3. 加入适量 37℃预热的含探针工作液。于生长状态下孵育 10 分钟～90 分钟（具体孵育时间需根据细胞类型而定，需预实验优化）。
4. 移除染色液，用 PBS（pH7.4）洗涤细胞 3 次。
5. 荧光显微镜（含合适滤片）或流式细胞仪、荧光酶标仪下观察。
最大激发/发射波长为 506 / 526 nm。
对于悬浮细胞
1. 离心，吸除上清。
2. 用 PBS 洗涤细胞。
3. 利用 37℃预热的探针工作液 100-200 µl 重悬细胞，于生长状态下孵育 20 分钟～60 分钟（具体时间需根据细胞类型而定，需预实验优化）。
4. 离心，吸除染色液，加入 PBS（pH7.4）重悬细胞，洗涤 3 次。
5. 流式细胞仪、荧光酶标仪检测。
6. 最大激发/发射波长为 506 / 526 nm。
荧光检测：
1. 对于原位标记探针的样品可以用荧光酶标仪检测，荧光显微镜，激光共聚焦显微镜直接拍照分析（需要有相关的荧光强度分析软件），或收集细胞后用荧光分光光度计、荧光酶标仪或流式细胞仪检测。
2. 对于收集细胞后标记探针的样品可以用荧光分光光度计、荧光酶标仪或流式细胞仪检测，或者用激光共聚焦显微镜直接拍照分析亦可。
3. 使用 506 nm 激发波长，526 nm 发射波长，实时或逐时间点检测刺激前后荧光的强弱。单线态氧浓度高则荧光强度强。
常见问题分析：
1.荧光照片如何分析？
需要有相关的荧光强度分析软件。单线态氧表达水平直接通过荧光信号的强弱和分布范围来体现。
有的显微镜扫描下来的图像本身就可以测面积和强度，可以同时测不同颜色的荧光强度。有的显微镜不支持此功能，可以将荧光染色彩色图像转换为黑白的灰度图，然后再以灰度值作为测量指标进行分析。
要结合明场的照片具体分析。如果细胞分布均匀可以算固定面积荧光强度。成像时中心和四周有差异时，一般将四周剪切掉也可以。如果细胞分布不匀，需要找到细胞分布匀称的视野，一个视野一个视野找。
如果要用图片做结果，就要平行做多个图片，作分析，统计，每张都要求荧光分布尽量一致。
为了去除杂光的影响，可以适当调节统计荧光的强度范围，将信号过弱的背景杂光去除掉。
对照组和实验组整张图片需要做同样的处理，保证所有参数均要一致。
对于不同情况荧光强度的统计方法，根据实验需要或参考文献。可以算等面积的平均强度；也可以算阈值高于一定值的平均强度；也可以算荧光的累积而不算平均。要根据课题需要选择合适的测量统计方法。
仅用于科研，不能用于临床诊断！所有产品仅供科研使用，不得用于人或动物的治疗等任何其他用途，不为任何个人提供产品和服务。以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。
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