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活性氮（RNS）检测试剂盒-红色荧光
价格：￥ 100T/1600元；200T/2700元
品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/19 10:46:00
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详细内容
活性氮（RNS）检测试剂盒-红色荧光
产品货号：XY9-462112
产品规格及价格：100T/1600元；200T/2700元
产品简介：
活性氮检测试剂盒是一种利用荧光探针 O53进行活性氮检测的试剂盒。O53探针本身荧光很弱，可以自由穿过细胞膜，进入细胞内后，在活性氮存在的条件下，O53与活性氮反应生成强荧光物质，发出的红色荧光强度与细胞内活性氮水平成正比，检测O53的荧光强度就可以知道细胞内活性氮的水平。
O53的荧光最大激发波长是518 nm，最大发射波长是606 nm。
在激发波长518 nm，发射波长606 nm附近，使用激光共聚焦显微镜、荧光显微镜、荧光分光光度计、荧光酶标仪、流式细胞仪等检测O53荧光强度，从而测定细胞内活性氮水平。
本试剂盒可以用于各种真核培养细胞的检测。
活性氮检测试剂具有高的灵敏度，良好的选择性，短的响应时间，以及可对检测对象在原位进行实时监控和观察等。更重要的是，这种检测技术对细胞内活性氮的内源性分布不产生巨大的外加干扰，从而能地得到内源性活性氮变化的真实信息。
活性氮（reactive nitrogen species，RNS）是指NO与包括活性氧在内的化合物相互作用,生成一系列包括ONOO•及其质子形式过氧亚硝酸（HOONO）等具有高度氧化活性的自由基和硝基类化合物,这些与活性氧相对应的以NO为中心的衍生物称为活性氮。活性氮主要包括氮氧化物一氧化氮（NO）和二氧化氮（NO2）、过氧化亚硝酰阴离子（ONOO•）、亚硝酰氢（HNO）、亚硝酸根离子（NO2-）和氨等。
O系列活性氮探针具有多种颜色可以选择，可根据情况对样品进行多色标记实验。除了本试剂盒的红色荧光探针，贝博还可以提供蓝色、红色、深红色荧光的活性氮检测试剂盒。
可以为您提供各种细胞样本、切片样本、组织样本的活性氧、活性氮检测试剂盒产品。
可以为您提供总活性氧、总活性氮和各种亚型的活性氧/活性氮的检测试剂盒产品。
可以为您提供各种红色、红色、蓝色、深红色的活性氧/活性氮检测试剂盒产品。
可以提供各种细胞分析试剂盒。包括细胞凋亡、活性、增殖、毒性、活性氧、周期、细胞代谢、氧化应激、膜流动性、膜电位、膜通透性转换孔、细胞耗氧率、胞外酸化、细胞内pH、细胞粘附、细胞自噬等数百种细胞检测试剂盒产品。
产品特点：
1.使用方便：可用激光共聚焦显微镜直接拍照分析、荧光分光光度计、荧光酶标仪或流式细胞仪检测；
2.背景低，灵敏度高；
3.线性范围宽，使用方便。
使用方法：
1.螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体收集至管底，避免开盖时液体洒落。
2.染色液为 DMSO 溶液，冬季气温较低时在室温时为凝固状态，极易粘附在管壁、吸头壁。注意需要加热溶解，吸头也需要放在培养箱预热，否者容易再次凝固在吸头内壁产生损耗。
3.使用前，先将本品取出回温至室温，并对其进行简短离心使 DMSO 溶液集中于管底。
4.尽量缩短探针标记后到测定所用的时间，以减少各种可能的误差。
5.必须使用荧光检测专用的黑色 96 孔板。
探针染色工作液配制：
根据样本数量，用 HBSS 将 O53 荧光染料 100 倍稀释，配制成染色工作液。
细胞探针标记
原位标记：仅适用于贴壁培养细胞。
1. 培养板/培养皿准备细胞样本。
2. 待细胞生长到合适丰度，去除细胞培养基，用 PBS 洗细胞一次。
3. 加入适量体积 37℃预热的含 O53 探针工作液。
4. 在 37℃细胞培养箱内于生长状态下避光孵育 20 分钟～40 分钟（具体孵育时间需根据细胞类型而定，需预实验优化）。
5. 移除染色液，用 PBS（pH7.4）洗涤细胞 3 次。以充分去除未进入细胞内的 O53 探针。
6. 加入 200 µl HBSS 缓冲液。
7. 荧光酶标仪、荧光显微镜（含合适滤片）检测。最大激发/发射波长为 518 nm / 606 nm。
收集后标记：悬浮细胞或贴壁细胞消化处理
1. 离心，吸除上清培养基。
2. 用 PBS 洗细胞一次。
3. 细胞收集后重悬浮于稀释好的 37℃预热的 O53 探针工作液中，细胞浓度为 1*106-2*107/毫升。
4. 于生长状态下 37℃细胞培养箱内避光孵育 20-40 分钟（具体时间需根据细胞类型而定，需预实验优化）。
每隔 3-5 分钟颠倒混匀一下，使探针和细胞充分接触。
5. 离心，吸除染色液，加入 PBS（pH7.4）重悬细胞，洗涤 3 次。以充分去除未进入细胞内的 O53 探针。
6. 用 HBSS/PBS/无血清细胞培养基重悬细胞。
7. 用荧光光度计、荧光酶标仪、流式细胞仪检测。
最大激发/发射波长为 518 nm / 606 nm。
活性氮检测：
1. 对于原位标记探针的样品可以用荧光酶标仪检测，或者用激光共聚焦显微镜、荧光显微镜，直接拍照分析（需要有相关的荧光强度分析软件）。
2. 或收集细胞后标记探针然后用荧光分光光度计、荧光酶标仪或流式细胞仪检测。
3. 对于收集细胞后标记探针的样品可以用荧光分光光度计、荧光酶标仪或流式细胞仪检测，用激光共聚焦显微镜直接拍照分析也可以（需要有相关的荧光强度分析软件）。
4. 使用 518 nm 激发波长，606 nm 发射波长，实时或逐时间点检测刺激前后荧光的强弱。
5. 荧光强度强，活性氮含量高。
常见问题分析：
1.活性氮结果如何分析？
RNS 是多种物质的统称，不像某一单一活性氮指标，无法检测其绝对的含量，只能通过设置参照样本，以参照样本的倍数来反映目标样本相对含量变化，这个“相对”是针对参照的。
分析结果是定性的，也是没有单位的，因为它本质上是一个比值（目标/参照）。反映的是模型样本通过具体的干预措施（如养分缺失、缺氧、药物治疗或遗传基因操控等）如何影响其 RNS 的变化，测定其 RNS 是增加或者降低了。
2.荧光照片如何分析？
需要有相关的荧光强度分析软件。RNS 表达水平直接通过荧光信号的强弱和分布范围来体现。
有的显微镜扫描下来的图像本身就可以测面积和强度，可以同时测不同颜色的荧光强度。有的显微镜不支持此功能，可以将荧光染色彩色图像转换为黑白的灰度图，然后再以灰度值作为测量指标进行分析。
要结合明场的照片具体分析。如果细胞分布均匀可以算固定面积荧光强度。成像时中心和四周有差异时，一般将四周剪切掉也可以。如果细胞分布不匀，需要找到细胞分布匀称的视野，一个视野一个视野找。
如果要用图片做结果，就要平行做多个图片，作分析，统计，每张都要求荧光分布尽量一致。
为了去除杂光的影响，可以适当调节统计荧光的强度范围，将信号过弱的背景杂光去除掉。
对照组和实验组整张图片需要做同样的处理，保证所有参数均要一致。
对于不同情况荧光强度的统计方法，根据实验需要或参考文献。可以算等面积的平均强度；也可以算阈值高于一定值的平均强度；也可以算荧光的累积而不算平均。要根据课题需要选择合适的测量统计方法。
仅用于科研，不能用于临床诊断！所有产品仅供科研使用，不得用于人或动物的治疗等任何其他用途，不为任何个人提供产品和服务。以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。
热门标签：活性氮,RNS,活性氮（RNS）检测试剂盒-红色荧光
