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过氧亚硝基阴离子检测试剂盒（ONOO–检测试剂盒）（红色荧光）
价格：￥ 100T/1600元；200T/2700元
品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/19 10:46:00
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详细内容
过氧亚硝基阴离子检测试剂盒（ONOO–检测试剂盒）（红色荧光）
产品货号：XY9-460652
产品规格及价格：100T/1600元；200T/2700元
检测原理
过氧亚硝基阴离子（ONOO-）检测试剂盒是一种利用荧光探针O58进行过氧亚硝基阴离子检测的试剂盒。O58可以自由穿过细胞膜，进入细胞内后，在过氧亚硝基阴离子存在的条件下，O58探针被氧化生成荧光物质O58F，O58F的红色荧光强度与细胞内过氧亚硝基阴离子水平成正比，检测O58F红色荧光就可以知道细胞内过氧亚硝基阴离子的水平。
在激发波长516 nm，发射波长606 nm附近，使用荧光显微镜、激光共聚焦显微镜、荧光分光光度计、荧光酶标仪、流式细胞仪等检测O58F 荧光，从而测定细胞内过氧亚硝基阴离子水平。
O58荧光探针对过氧亚硝基阴离子（ONOO-）有较高的选择性，但是也会与活性羟基有反应。
过氧亚硝基阴离子（ONOO-，Peroxynitrite anion）是活性氧家族的一员，活性氧(Reactive oxygen species, ROS) 包括过氧化氢（H2O2，Hydrogen peroxide）、羟基自由基（•OH，Hydroxyl radical）、单线态氧（1O2，Singlet oxygen）、一氧化氮（NO，Nitric oxide）、超氧阴离子(•O2-，Superoxide anion)、过氧化自由基(ROO• ，Peroxyl radical)、过氧羟自由基（HOO• ，hydroperoxyl）及其下游产物过氧化物过氧亚硝基阴离子（ONOO-，Peroxynitrite anion）、ClO-和羟化物等，参与细胞生长增殖、发育分化、衰老和凋亡以及许多生理和病理过程。
活性氧(reactive oxygen species,ROS)的产生主要是氧化磷酸化的结果，在呼吸链中，在某些位点会有“泄露”的电子直接和氧气或和其他电子受体反应，在酶或非酶作用下引发一系列反应生成不同种类的活性氧：“泄露”的电子最初和氧气反应生成超氧阴离子自由基(O2•-)(图1A)。超氧阴离子遇水生成H2O2(图1B)，同时过氧化氢也可由氧气在单胺氧化酶(monoamine oxidase,MAO)的作用下生成(图1C)，生成的过氧化氢在髓过氧化物酶(myeloperoxidase, MPO)的催化下与Cl-反应可生成ClO-(图1D)，在铁或铜离子的催化下发生Fenton反应生成OH•(图1E)，超氧阴离子遇氮氧化物反应生成ONOO-(图1F)。这些生成的高氧化活性的物质统称为活性氧。
本试剂盒可以用于各种真核培养细胞的检测。
O系列活性氧探针具有多种颜色可以选择，可根据情况对样品进行多色标记实验。除了本试剂盒的红色荧光探针还可以提供绿色、蓝色、深红色荧光的活性氧检测试剂盒。
还可以为您提供各种组织、细胞样本、切片样本的活性氧、活性氮等各种颜色的检测试剂盒产品。
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可以提供动物、植物、微生物、酵母、水产、家禽、兽类、土壤等样本的各种生化指标检测的数百种试剂盒产品。
产品特点：
1.使用方便：可用荧光分光光度计、荧光酶标仪、激光共聚焦显微镜直接观察或流式细胞仪检测；
2.背景低，灵敏度高；
3.线性范围宽，使用方便。
使用方法：
1.螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体收集至管底，避免开盖时液体洒落。
2.荧光探针标记后，一定要洗净残余的未进入细胞内的探针，否则会导致背景较高。
3.探针标记完毕并洗净残余探针后，可以进行激发波长的扫描和发射波长的扫描，以确认探针的标记情况是否正常。
4.尽量缩短探针标记后到测定所用的时间，以减少各种可能的误差。
5.原位检测必须使用荧光检测专用的黑色透明底 96 孔细胞培养板。
6.以下操作步骤仅供参考，请根据实际样本情况调整或参考文献。
7.酚红对 O58 荧光探针的检测有干扰，需避免。
8.染色后立即进行分析。
9.以下步骤仅做为参考，稀释比例和孵育时间可根据实际情况来调整。比如，对于某些细胞，如果发现未被刺激的阴性对照细胞荧光也比较强，可降低探针浓度。如果发现用感兴趣的药物刺激后荧光较弱，可升高O58 探针浓度，以提高检测的灵敏度。另外，探针装载的时间也可以根据情况在 15-60 分钟内适当进行调整，孵育温度在 4 -37 ℃ ℃内调整。
10.酶标仪检测必须使用荧光检测专用的黑色 96 孔板。
1. 探针染色工作液配制：
根据样本数量，用 HBSS 将 O58 荧光染料 1000-5000 倍稀释，配制成染色工作液。
2. 细胞探针标记
2.1 对于贴壁细胞，可以进行原位标记
1）培养皿/培养板准备细胞样本。
2）待细胞生长到合适丰度，吸除培养液，加入适量 37℃预热的含探针工作液。于生长状态下孵育 10 分钟～90 分钟（具体孵育时间需根据细胞类型而定，需预实验优化）。
3）移除染色液，用 PBS（pH7.4）洗涤细胞 3 次。
4）荧光显微镜（含合适滤片）或流式细胞仪、荧光酶标仪下观察。最大激发/发射波长为 516 / 606 nm。2.2 对于悬浮细胞
1）离心，吸除上清。
2）利用 37℃预热的探针工作液 100-200 µl 重悬细胞，于生长状态下孵育 20 分钟～60 分钟（具体时间需根据细胞类型而定，需预实验优化）。
3）离心，吸除染色液，加入 PBS（pH7.4）重悬细胞，洗涤 3 次。
4）流式细胞仪、荧光酶标仪检测。最大激发/发射波长为 516 / 606nm。
3．检测：
对于原位标记探针的样品可以用荧光酶标仪检测，荧光显微镜，激光共聚焦显微镜直接拍照分析，或收集细胞后用荧光分光光度计、荧光酶标仪或流式细胞仪检测。对于收集细胞后标记探针的样品可以用荧光分光光度计、荧光酶标仪或流式细胞仪检测，或者用激光共聚焦显微镜直接拍照分析亦可。
使用 516 nm 激发波长，606 nm 发射波长，实时或逐时间点检测刺激前后荧光的强弱。
过氧亚硝基阴离子浓度高则荧光强度强。
仅用于科研，不能用于临床诊断！所有产品仅供科研使用，不得用于人或动物的治疗等任何其他用途，不为任何个人提供产品和服务。以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。
热门标签：过氧亚硝基阴离子,ONOO–检测试剂盒,过氧亚硝基阴离子检测试剂盒（ONOO–检测试剂盒）（红色荧光）
