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细菌单线态氧检测试剂盒-红色荧光
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详细内容
细菌单线态氧检测试剂盒-红色荧光
产品货号:XY9-461162
产品规格及价格:100T/1600元;200T/2700元
产品简介:
细菌单线态氧(1O2)检测试剂盒是一种利用荧光探针 O69进行单线态氧检测的试剂盒。O69可以自由穿过细菌胞膜,进入胞内后,在单线态氧存在的条件下,O69探针被氧化生成荧光物质O69F,O69F的红色荧光强度与胞内单线态氧水平成正比,检测O69F红色荧光强度就可以知道细胞内单线态氧的水平。
在激发波长640 nm,发射波长670 nm附近,使用荧光分光光度计、荧光酶标仪、流式细胞仪、荧光显微镜、激光共聚焦显微镜等检测O69F 荧光强度,从而测定细胞内单线态氧水平。
O69荧光探针对单线态氧(1O2)有较高的选择性,但是也会与活性羟基有反应。
单线态氧(1O2,Singlet oxygen)是活性氧家族的一员,活性氧(Reactive oxygen species, ROS) 包括过氧化氢(H2O2,Hydrogen peroxide)、羟基自由基(•OH,Hydroxyl radical)、单线态氧(1O2,Singlet oxygen)、一氧化氮(NO,Nitric oxide)、超氧阴离子(•O2-,Superoxide anion)、过氧化自由基(ROO• ,Peroxyl radical)、过氧羟自由基(HOO• ,hydroperoxyl)及其下游产物过氧化物单线态氧(1O2,Peroxynitrite anion)、ClO-和羟化物等,参与细胞生长增殖、发育分化、衰老和凋亡以及许多生理和病理过程。
活性氧(reactive oxygen species,ROS)的产生主要是氧化磷酸化的结果,在呼吸链中,在某些位点会有“泄露”的电子直接和氧气或和其他电子受体反应,在酶或非酶作用下引发一系列反应生成不同种类的活性氧:“泄露”的电子最初和氧气反应生成超氧阴离子自由基(O2·-)(图1A)。超氧阴离子遇水生成H2O2(图1B),同时过氧化氢也可由氧气在单胺氧化酶(monoamine oxidase,MAO)的作用下生成(图1C),生成的过氧化氢在髓过氧化物酶(myeloperoxidase, MPO)的催化下与Cl-反应可生成ClO-(图1D),在铁或铜离子的催化下发生Fenton反应生成OH·(图1E),超氧阴离子遇氮氧化物反应生成ONOO-(图1F)。这些生成的高氧化活性的物质统称为活性氧。
本试剂盒可以用于各种革兰氏阳性和阴性细菌样本的检测。
O系列活性氧探针具有多种颜色可以选择,可根据情况对样品进行多色标记实验。除了本试剂盒的红色荧光探针, 还可以提供绿色、蓝色、深红色荧光的活性氧检测试剂盒。
保存温度
-20℃避光保存

使用注意事项
1. 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体收集至管底,避免开盖时液体洒落。
2. 荧光探针标记后,一定要洗净残余的未进入细胞内的探针,否则会导致背景较高。
3. 探针标记完毕并洗净残余探针后,可以进行激发波长的扫描和发射波长的扫描,以确认探针的标记情况是否正常。
4. 尽量缩短探针标记后到测定所用的时间,以减少各种可能的误差。
5. O69染色液为DMSO溶液,冬季气温较低时在室温时为凝固状态,极易粘附在管壁、吸头壁。注意需要加热溶解,吸头也需要放在培养箱预热,否者容易再次凝固在吸头内壁产生损耗。
6. 使用前,先将本品取出回温至室温,并对其进行简短离心使DMSO溶液集中于管底。
7. 细胞处理需要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。
8. 标记的条件因细胞种类而异,根据不同样本的实际染色结果做相应调整,在每次实验前,请先根据不同的实验要求、细胞类型、细胞的膜通透性等进行优化,确定最佳条件。以下方法仅供参考。
9. 染色后立即进行分析。
10. 以下步骤仅做为参考,稀释比例和孵育时间可根据实际情况来调整。比如,对于某些细胞,如果发现未被刺激的阴性对照细胞荧光也比较强,可降低探针浓度。如果发现用感兴趣的药物刺激后荧光较弱,可升高O69探针浓度,以提高检测的灵敏度。另外,探针装载的时间也可以根据情况在15-60分钟内适当进行调整,孵育温度在4℃-37℃内调整。
11. 酶标仪检测必须使用荧光检测专用的黑色96孔板。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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