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切片过氧化氢检测试剂盒（H2O2检测试剂盒）-绿色荧光
价格：￥ 100T/1600元；200T/2700元
品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/19 10:46:00
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详细内容
切片过氧化氢检测试剂盒（H2O2检测试剂盒）-绿色荧光
产品货号：XY9-46081
产品规格及价格：100T/1600元；200T/2700元
产品简介：
过氧化氢（H2O2，Hydrogen peroxide）是体内的一种活性氧(Reactive oxygen species, ROS) 状态，参与细胞生长增殖、发育分化、衰老和凋亡以及许多生理和病理过程。
过氧化氢检测试剂盒是利用过氧化氢特异性荧光探针过氧化氢探针O16检测过氧化氢的试剂盒。过氧化氢探针O16是合成的苯蒽类荧光探针，可以自由穿过细胞膜，进入细胞内后，与细胞内过氧化氢反应，被氧化生成绿色荧光物质，绿色荧光强度与细胞内过氧化氢水平成正比，检测绿色荧光就可以知道细胞内过氧化氢的变化情况。
O16过氧化氢荧光探针具有极高的H2O2反应特异性，与其它类型的活性氧反应较少。
在激发波长488 nm，发射波长526 nm附近，使用荧光显微镜、激光共聚焦显微镜等检测绿色荧光强度，从而测定样本内过氧化氢水平。利用本试剂盒可以快速定性检测样本内过氧化氢水平变化差异。
切片样本的过氧化氢检测一般使用振动切片或者新鲜的冰冻切片样本。石蜡切片样本的过氧化氢在石蜡切片的的制作过程中会损失掉，有条件的话就使用振动切片或者冰冻切片样本，一般不建议使用石蜡切片样本。已经制备好的石蜡切片样本中残余的过氧化氢也可以用本试剂盒检测。
有条件的话也可以直接用组织样本检测，不需要制备成切片的过氧化氢检测试剂盒（相关产品：BB-460712）。
除了绿色荧光的过氧化氢检测试剂盒，也可以提供红色、蓝色、深红色等其它颜色的检测试剂盒（相关产品：BB-460812/460813）。
过氧化氢（H2O2，Hydrogen peroxide）是活性氧家族的一员，活性氧(Reactive oxygen species, ROS) 包括过氧化氢（H2O2，Hydrogen peroxide）、羟基自由基（•OH，Hydroxyl radical）、单线态氧（1O2，Singlet oxygen）、一氧化氮（NO，Nitric oxide）、超氧阴离子(•O2-，Superoxide anion)、过氧化自由基(ROO• ，Peroxyl radical)、过氧羟自由基（HOO• ，hydroperoxyl）及其下游产物过氧化物过氧亚硝基阴离子（ONOO-，Peroxynitrite anion）、ClO-和羟化物等，参与细胞生长增殖、发育分化、衰老和凋亡以及许多生理和病理过程。
活性氧(reactive oxygen species,ROS)的产生主要是氧化磷酸化的结果，在呼吸链中，在某些位点会有“泄露”的电子直接和氧气或和其他电子受体反应，在酶或非酶作用下引发一系列反应生成不同种类的活性氧：“泄露”的电子最初和氧气反应生成超氧阴离子自由基(O2·-)(图1A)。超氧阴离子遇水生成H2O2(图1B)，同时过氧化氢也可由氧气在单胺氧化酶(monoamine oxidase,MAO)的作用下生成(图1C)，生成的过氧化氢在髓过氧化物酶(myeloperoxidase, MPO)的催化下与Cl-反应可生成ClO-(图1D)，在铁或铜离子的催化下发生Fenton反应生成OH·(图1E)，超氧阴离子遇氮氧化物反应生成ONOO-(图1F)。这些生成的高氧化活性的物质统称为活性氧。
产品特点：
1. 使用方便：可用荧光显微镜直接观察；
2. 背景低，灵敏度高；
3. 线性范围宽，使用方便。
使用方法：
1. 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体收集至管底，避免开盖时液
体洒落。
2. 尽量缩短探针标记后到测定所用的时间，以减少各种可能的误差。
3. 对于某些样本，如果荧光太强，可以按照 1:200-1:1000 稀释探针。探针标记的时间也可以根据情
况在 20-60 分钟内适当进行调整。
4. 尽量缩短探针标记后到测定所用的时间，以减少各种可能的误差。
5. 过氧化氢 O16 探针在光照和空气中易被氧化，注意避光密封保存。
6. O16 染色工作液必须现配现用，并且在当天用完。
7. O16 对湿度非常敏感，若是 O16 溶液每次取完需要量后，必须紧紧密封盖子。建议根据单次用量，分装密封保存。不可使用含水的吸头。
8. 对不同的组织，应选择合适的孵育时间和浓度，以观察过氧化氢的变化，很多细胞内的过氧化氢绝对水平较低，需要根据实际情况适当延长孵育时间。
9. 过氧化氢 O16 探针可以根据需要的用量分装后冻存，避免反复冻融。
10. 过氧化氢 O16 探针不可以一次性全部稀释后长期保存不用，稀释后稳定性变差，有效期缩短。
11. 冰冻切片制作不需要经过固定脱水包埋等步骤，直接冷冻后切片贴片。
12. 有条件也可以采用振动切片的方法。有些方便处理的样品类型也可以采用徒手切片。
13. 以下操作步骤仅供参考，请根据实际样本情况调整。
一、 试剂配制
1. 根据样本数，用纯水将O16 过氧化氢荧光探针 200 倍稀释，配成染色工作液。
2. 用纯水将 10X 清洗液 10 倍稀释，配成 1X 清洗液工作液。
二、 探针标记
1. 准备待测的厚为 10 µm 的未经固定处理的冰冻切片。
2. 室温下，小心加上 200 µl 清洗液工作液，铺满整个切片表面，静置 5-10 分钟。
3. 小心吸除清洗液。
4. 滴加 100 µl 染色工作液，在 37℃培养箱避光孵育 20-60 分钟。
5. 移除染色液。
6. 用 PBS 洗涤切片 2-3 次。
7. 加盖玻片或甘油封片。
8. 荧光显微镜检测。
常见问题分析：
1. 荧光照片如何分析？
需要有相关的荧光强度分析软件。H2O2 表达水平直接通过荧光信号的强弱和分布范围来体现。
有的显微镜扫描下来的图像本身就可以测面积和强度，可以同时测不同颜色的荧光强度。有的显微镜不支持此功能，可以将荧光染色彩色图像转换为黑白的灰度图，然后再以灰度值作为测量指标进行分析。
要结合明场的照片具体分析。如果细胞分布均匀可以算固定面积荧光强度。成像时中心和四周有差异时，一般将四周剪切掉也可以。如果细胞分布不匀，需要找到细胞分布匀称的视野，一个视野一个视野找。
如果要用图片做结果，就要平行做多个图片，作分析，统计，每张都要求荧光分布尽量一致。
为了去除杂光的影响，可以适当调节统计荧光的强度范围，将信号过弱的背景杂光去除掉。
对照组和实验组整张图片需要做同样的处理，保证所有参数均要一致。
对于不同情况荧光强度的统计方法，根据实验需要或参考文献。可以算等面积的平均强度；也可以算阈值高于一定值的平均强度；也可以算荧光的累积而不算平均。要根据课题需要选择合适的测量统计方法。
2. 荧光照片效果不好？
荧光拍照存在很多变量，每一个变量都会严重影响拍照效果。
荧光拍摄条件：拍摄环境、显微镜品牌和激发荧光决定了镜下观察的效果。同样的操作方法和切片，在不同品牌显微镜下显示出完全不同的荧光强度。
荧光衰减：荧光物质的衰减通常都是非常明显的。同样的一组切片，1 小时内拍摄和 8 小时后拍摄，荧光效果完全不同。
用激光共聚焦显微镜，激光共聚焦显微镜的分辨率比普通荧光显微镜要高的多，通常同一张片子激光共聚焦的更优。
仅用于科研，不能用于临床诊断！所有产品仅供科研使用，不得用于人或动物的治疗等任何其他用途，不为任何个人提供产品和服务。以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。
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