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HG SYBR Green RNU6B定量PCR试剂盒
价格：￥ 100次/500
品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/15 11:05:14
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详细内容
HG SYBR Green RNU6B定量PCR试剂盒
描述：HG miRNA SYBR Green PCR Kit 使
用 Peter 改良的 miR-Q 技术，采用特异性的上下游引物
对反转录所得 miRNA 的 cDNA 产物进行定量检测【参考
文献 1】。不同于其它公司的单条特异性引物扩增方法， 采用双向特异性扩增引物（原理如图 1），从而
极大提高了 miRNA 的检测特异性，其可以区分极高相似
度的 miRNA 分子、减少非特异性扩增（图 2，3 所示），
该试剂盒的检测灵敏度可达 0.001fM。该试剂盒对可以对
任何 miRNA 分子进行检测。HG miRNA 荧光定量 PCR
试剂盒共有一万余种，每一个 miRNA 分子对应一个检测
试剂盒，如果您
研究的 mircoRNA 分子不在我们的列表中，请来信咨询，
我们将及时给您优化设计。该试剂盒中的每一对引物均经
过设计优化，确保扩增效率和特异性。使用该方法进行
miRNA 定量检测已被大量文献所采用【参考文献 2～11】。
组分
储存：避光置于-20°C，可保存 2 年；避免反复冻融
注：其它 miRNA 荧光定量检测试剂盒见 HG miRNA qPCR
kit.xls。
操作方法
1. 按以下组分配制反转录反应液
2. 在 PCR 仪上按以下条件进行反应:
3. 获得 cDNA 产物后使用 HG miRNA 荧光定量 PCR 试剂
盒进行 miRNA 定量检测。
根据机型选择步骤 A 或 B，配制反应体系
A: 需要添加 ROX 染料进行反应孔间信号矫正的 Real-Time
PCR 仪，包括：ABI PRISM 7900HT、7300、7500 Real-Time
PCR (Applied Biosystems)；Mx3000P (Stratagene)等。按
照如下组分配制 20 µl PCR 反应体系：
B:无需添加 ROX 染料进行反应孔间信号矫正的 RealTime PCR 仪，包括：LightCycler (Roche Diagnostics)；
MiniOpticon、Opticon2、MyiQ 2、CFX96 Real-Time
PCR(Bio-Rad & MJ)；Line-Gene(Bioer，)等。
按照如下组分配制 20µl PCR 反应体系：
*:引物初次使用请用 0.4 µl，视实验结果进行调整。
4 进行 Real-Time PCR 反应,
通常采用两步法，程序如下：
注意：使用该方法通常可以准确检测到>0.01fM 的 microRNA 分子，
过多的循环数会造成精确性降低。推荐的循环数为 30 个，在检测
极低样品浓度时可将循环数调整到 35 个。
5. 扩增结果分析和数据处理
反应结束后确认 Real-Time PCR 的 cDNA 样品和 NTC 阴性
对照的扩增曲线和融解曲线。
6. 标准品的使用
该试剂盒配备的标准品为单链 DNA 分子，其与目标
microRNA 分子反转录产物完全相同，因此可直接用于 PCR
扩增，从而检测 PCR 体系的可靠性。其浓度为 1pM，通常
20µl PCR 体系中加入 1µl，可获得 Ct 值在 15 左右的数据。
除此外，可以使用 TE Buffer 进行稀释，最低可稀释到
0.01fM，用于标准曲线扩增或绝对定量试验。
注意事项：该产品仅供科研使用，不得用于临床诊断及其他用途，产品说明书以到货说明书为准，网站说明书仅供参考！
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