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DHR-ROS活性氧检测试剂盒-绿色荧光
价格：￥ 200T/1600元
品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/19 10:43:39
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详细内容
DHR-ROS活性氧检测试剂盒-绿色荧光
产品货号：XY9-47052
产品规格及价格：200T/1600元
产品简介：
DHR活性氧检测试剂盒是一种利用荧光探针DHR进行活性氧定性检测的试剂盒。
DHR可自由透过活细胞膜进入细胞内，并被细胞内的ROS氧化，形成发绿色荧光的Rho123，并稳定存在于细胞内。被氧化生成绿色荧光物质，绿色荧光强度与细胞内活性氧水平成正比，检测产物的荧光强度就可以知道细胞内活性氧的水平。
DHR活性氧探针具有488 nm / 520 nm的最大激发/发射波长。在激发波长488 nm，发射波长520 nm附近，使用荧光分光光度计、荧光酶标仪、激光共聚焦显微镜、荧光显微镜、流式细胞仪等检测产物的荧光强度，从而测定细胞内活性氧水平。
本试剂盒可以用于各种真核培养细胞的总活性氧的快速定性检测。通过荧光强度的大小来快速确定具体的干预措施（如养分缺失、缺氧、药物治疗或遗传基因操控等）如何影响细胞的活性氧变化，活性氧增加的样本荧光强度大。
O系列活性氧探针具有多种颜色可以选择，可根据情况对样品进行多色标记实验。除了本试剂盒的绿色荧光探针，还可以提供蓝色、红色、深红色荧光的活性氧检测试剂盒。
可以为您提供各种细胞样本、切片样本、组织样本的活性氧、活性氮检测试剂盒产品。
可以为您提供总活性氧、总活性氮和各种亚型的活性氧/活性氮的检测试剂盒产品。
可以为您提供各种绿色、红色、蓝色、深红色的活性氧/活性氮检测试剂盒产品。
可以提供各种细胞分析试剂盒。包括细胞凋亡、活性、增殖、毒性、活性氧、周期、细胞代谢、氧化应激、膜流动性、膜电位、膜通透性转换孔、细胞耗氧率、胞外酸化、细胞内pH、细胞粘附、细胞自噬等数百种细胞检测试剂盒产品。
产品应用：
1.荧光分光光度计
2.荧光酶标仪
3.流式细胞仪
4.荧光显微镜
5.激光共聚焦
产品特点：
1.使用方便：可用荧光分光光度计、荧光酶标仪或流式细胞仪检测或激光共聚焦显微镜直接拍照分析；
2.背景低，灵敏度高；
3.线性范围宽，使用方便。
使用方法：
1.螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体收集至管底，避免开盖时液体洒落。
2.荧光探针标记后，一定要洗净残余的未进入细胞内的探针，否则会导致背景较高。
3.探针标记完毕并洗净残余探针后，可以进行激发波长的扫描和发射波长的扫描，以确认探针的标记情况是否正常。
4.尽量缩短探针标记后到测定所用的时间，以减少各种可能的误差。
5.对于药物作用时间较短(2 小时以内)的细胞，先标记探针，后用药物刺激细胞。对于药物作用时间较长(6 小时以上)的细胞，先用活性氧阳性对照诱导剂或相应的药物刺激细胞，后标记探针。
6.DHR 在光照和空气中易被氧化，注意避光密封保存。
7.对不同的细胞和组织，应选择合适的孵育时间和浓度，以观察 ROS 的变化，很多细胞内的 ROS 绝对水平较低，需要根据实际情况适当延长孵育时间。
8.DHR 探针可以根据需要的用量分装后冻存，避免反复冻融。
9.DHR 不可以一次性全部稀释后长期保存不用，稀释后稳定性变差，有效期缩短。
DHR 探针配制：
1. DHR 探针可在新鲜无血清培养基、各种缓冲盐溶液中稀释到所需浓度，500-1000 倍稀释，以此染色工作液更换细胞培养基；也可直接向细胞培养基中加入 DHR 探针溶液至所需浓度。
2. 依据细胞 ROS 含量的不同，DHR 终浓度可选择在 500-1000 倍稀释的范围，孵育时间可选择 20-120 分钟，在 37℃或室温进行避光孵育。
DHR 探针标记：
原位标记：仅适用于贴壁培养细胞。
1. 按照 1:500-1000 用无血清培养基稀释 DHR 探针。
2. 去除细胞培养基，用 PBS 洗细胞一次。
3. 加入适当体积稀释好的DHR 探针。加入的体积以能充分盖住细胞为宜，通常对于96 孔板每孔加入 100-200µl 染色液，六孔板的一个孔加入稀释好的 DHR 探针不少于 1 毫升。
4. 在 37℃细胞培养箱内避光孵育 20-120 分钟。
5. 用无血清细胞培养液洗涤细胞三次，以充分去除未进入细胞内的 DHR 探针。
收集后标记：悬浮细胞或贴壁细胞消化处理
1. 按照 1:1000 用无血清培养基稀释 DHR 探针。
2. 离心移除培养基，用 PBS 洗细胞一次。
3. 细胞收集后悬浮于稀释好的DHR 探针中，细胞浓度为 1*106-2*107/毫升，37℃细胞培养箱内避光孵育 20-120 分钟。每隔 3-5 分钟颠倒混匀一下，使探针和细胞充分接触。
4. 用无血清细胞培养基洗涤细胞三次，以充分去除未进入细胞内的 DHR 探针。
5. 用无血清细胞培养基重悬细胞。
荧光显微镜检测：
1. 对贴壁生长细胞，可直接在荧光显微镜下观察；对悬浮生长细胞，取 25-50µl 细胞悬液滴到一张显微载玻片上，再盖上一张盖玻片。
2. 荧光显微镜下，用蓝光激发，观察和拍摄细胞绿色发射图像，ROS 阳性细胞在整个核区被染成绿色。
流式细胞仪分析：
1. 对贴壁生长细胞，用胰酶消化制备成单细胞悬液；对悬浮生长细胞，直接收集细胞。用 0.5~1 ml冰冷 PBS 重悬细胞（5~10 万）。
2. 采用 488nm 波长激发，测定待测细胞平均荧光强度。
常见问题分析：
1.活性氧结果如何分析？
ROS 是多种物质的统称，不像某一单一活性氧指标，无法检测其绝对的含量，只能通过设置参照样本，以参照样本的倍数来反映目标样本相对含量变化，这个“相对”是针对参照的。
分析结果是定性的，也是没有单位的，因为它本质上是一个比值（目标/参照）。反映的是模型样本通过具体的干预措施（如养分缺失、缺氧、药物治疗或遗传基因操控等）如何影响其 ROS 的变化，测定其 ROS 是增加或者降低了。
2.荧光照片如何分析？
需要有相关的荧光强度分析软件。ROS 表达水平直接通过荧光信号的强弱和分布范围来体现。
有的显微镜扫描下来的图像本身就可以测面积和强度，可以同时测不同颜色的荧光强度。有的显微镜不支持此功能，可以将荧光染色彩色图像转换为黑白的灰度图，然后再以灰度值作为测量指标进行分析。
要结合明场的照片具体分析。如果细胞分布均匀可以算固定面积荧光强度。成像时中心和四周有差异时，一般将四周剪切掉也可以。如果细胞分布不匀，需要找到细胞分布匀称的视野，一个视野一个视野找。
如果要用图片做结果，就要平行做多个图片，作分析，统计，每张都要求荧光分布尽量一致。
为了去除杂光的影响，可以适当调节统计荧光的强度范围，将信号过弱的背景杂光去除掉。
对照组和实验组整张图片需要做同样的处理，保证所有参数均要一致。
对于不同情况荧光强度的统计方法，根据实验需要或参考文献。可以算等面积的平均强度；也可以算阈值高于一定值的平均强度；也可以算荧光的累积而不算平均。要根据课题需要选择合适的测量统计方法。
3.荧光照片效果不好？
荧光拍照存在很多变量，每一个变量都会严重影响拍照效果。
荧光拍摄条件：拍摄环境、显微镜品牌和激发荧光决定了镜下观察的效果。同样的操作方法和切片，在不同品牌显微镜下显示出完全不同的荧光强度。
荧光衰减：荧光物质的衰减通常都是非常明显的。同样的一组切片，1 小时内拍摄和 8 小时后拍摄，荧光效果完全不同。
用激光共聚焦显微镜，激光共聚焦显微镜的分辨率比普通荧光显微镜要高的多，通常同一张片子激光共聚焦的更优。
4.背景荧光比较高？
在没有细胞外酯酶和其他氧化酶的情况下，荧光随时间的逐渐增加可能是来自自发水解，导致水解的原因可能与大气氧化或光诱导氧化有关。
5.荧光强度在变化？
可以观察到荧光的逐渐增加（由于自动氧化）或减少（由于细胞中的染料损失或光漂白）。
在没有任何刺激或诱导的情况下，健康的未经处理的细胞中的荧光突发可以指示细胞死亡或一些其他氧化事件的进展。
注意检测时平行操作即可。
仅用于科研，不能用于临床诊断！所有产品仅供科研使用，不得用于人或动物的治疗等任何其他用途，不为任何个人提供产品和服务。以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。
热门标签：DHR-ROS,绿色荧光,DHR-ROS活性氧检测试剂盒-绿色荧光
