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组织一氧化氮检测试剂盒（NO检测试剂盒）-红色荧光
价格：￥ 100T/1600元；200T/2700元
品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/19 10:42:57
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详细内容
组织一氧化氮检测试剂盒（NO检测试剂盒）-红色荧光
产品货号：XY9-460732
产品规格及价格：100T/1600元；200T/2700元
产品简介：
组织一氧化氮检测试剂盒是一种利用新型荧光探针 O38进行组织一氧化氮检测的试剂盒。本试剂盒中的 O38 NO探针为红色荧光的一氧化氮探针，具有516 / 606 nm的最大激发/发射波长。
O38 NO探针在组织中一氧化氮存在的条件下，被氧化生成红色荧光物质，红色荧光强度与组织内一氧化氮水平成正比，检测O38产物的荧光强度就可以知道组织内一氧化氮的水平。
在激发波长516 nm，发射波长606 nm附近，使用荧光酶标仪、荧光分光光度计等设备检测O38产物荧光强度，从而测定组织内一氧化氮水平。
本试剂盒可以用于各种动物样本的总一氧化氮的快速定性检测。通过荧光强度的大小来快速确定具体的干预措施（如养分缺失、药物治疗或遗传基因操控等）如何影响一氧化氮变化，一氧化氮增加的样本荧光强度大。
O系列一氧化氮探针具有多种颜色可以选择，可根据情况对样品进行多色标记实验。除了本试剂盒的红色荧光探针，还可以提供蓝色、绿色、深红色荧光的一氧化氮检测试剂盒。
一般使用新鲜组织样本检测一氧化氮，反映的是组织当时的一氧化氮状态。冻存的组织样本的NO在长期冻存过程中会损失掉，有条件的话就使用新鲜样本，不建议使用冻存的组织样本。已经冻存的组织样本中残余的NO也可以用本试剂盒检测。
以每个组织样本50-100 mg计，本试剂盒小包装可以检测100个样本。
活性氧(Reactive oxygen species, ROS) 包括过氧化氢（H2O2，Hydrogen peroxide）、羟基自由基（•OH，Hydroxyl radical）、单线态氧（1O2，Singlet oxygen）、一氧化氮（NO，Nitric oxide）、超氧阴离子(•O2-，Superoxide anion)、过氧化自由基(ROO• ，Peroxyl radical)、过氧羟自由基（HOO• ，hydroperoxyl）及其下游产物过氧化物过氧亚硝基阴离子（ONOO-，Peroxynitrite anion）、ClO-和羟化物等，参与细胞生长增殖、发育分化、衰老和凋亡以及许多生理和病理过程。
活性氧(reactive oxygen species,ROS)的产生主要是氧化磷酸化的结果，在呼吸链中，在某些位点会有“泄露”的电子直接和氧气或和其他电子受体反应，在酶或非酶作用下引发一系列反应生成不同种类的活性氧：“泄露”的电子最初和氧气反应生成超氧阴离子自由基(O2·-)(图1A)。超氧阴离子遇水生成H2O2(图1B)，同时过氧化氢也可由氧气在单胺氧化酶(monoamine oxidase,MAO)的作用下生成(图1C)，生成的过氧化氢在髓过氧化物酶(myeloperoxidase, MPO)的催化下与Cl-反应可生成ClO-(图1D)，在铁或铜离子的催化下发生Fenton反应生成OH·(图1E)，超氧阴离子遇氮氧化物反应生成ONOO-(图1F)。这些生成的高氧化活性的物质统称为活性氧。
产品特点：
1. 使用方便：可用荧光酶标仪、荧光分光光度计检测；
2. 背景低，灵敏度高；
3. 线性范围宽，使用方便。
使用方法：
1. 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体收集至管底，避免开盖时液体洒落。
2. O38 探针染色液为 DMSO 溶液，冬季气温较低时在室温时为凝固状态，极易粘附在
管壁、吸头壁。注意需要加热溶解，吸头也需要放在培养箱预热，否者容易再次凝固在吸头内壁产生损耗。
3. 使用前，先将本品取出回温至室温，并对其进行简短离心使 DMSO 溶液集中于管底。
4. 尽量缩短探针标记后到测定所用的时间，以减少各种可能的误差。
5. 必须使用荧光检测专用的黑色 96 孔板。
试剂准备：
根据样本数量，用纯水将 O38 探针 10 倍稀释。充分混匀，备用。
样本处理：
1. 刚取得的新鲜组织样本用 PBS 洗净。
2. 准确称取 50 mg 或 100 mg 组织样本，加入 500 µl - 1 ml 检测缓冲液 A，用匀浆机/匀浆器充分匀浆。
样本检测：
1. 在 96 孔板中加入 190 微升匀浆上清液、10 微升 O38 探针，用移液器吹打，使之充分混匀。
2. 在 37℃避光孵育 20-30 分钟。
3. 置于酶标仪中，后于激发波长为 516 nm、发射波长 606 nm 检测荧光强度。
蛋白定量：
1. 另取 50 微升上清匀浆液，用 PBS 大约稀释 20-30 倍。
2. 取 100 微升进行蛋白定量，测定蛋白浓度（mg/ml）。
结果处理：
以荧光强度（RFU）/蛋白浓度（毫克蛋白）表示组织一氧化氮强度。
常见问题分析：
1. 一氧化氮结果如何分析？
通过设置参照样本，以参照样本的倍数来反映目标样本相对含量变化，这个“相对”是针对参照的。分析结果是定性的，也是没有单位的，因为它本质上是一个比值（目标/参照）。
反映的是模型样本通过具体的干预措施（如养分缺失、缺氧、药物治疗或遗传基因操控等）如何影响其 NO 的变化，测定其 NO 是增加或者降低了。
2. 背景荧光比较高？
在没有细胞外酯酶和其他氧化酶的情况下，荧光随时间的逐渐增加可能是来自自发水解，导致水解的原因可能与大气氧化或光诱导氧化有关。
3. 荧光强度在变化？
可以观察到荧光的逐渐增加（由于自动氧化）或减少（由于细胞中的染料损失或光漂白）。
在没有任何刺激或诱导的情况下，健康的未经处理的样本中的荧光突发可以指示细胞死亡或一些其他氧化事件的进展。
注意检测时平行操作即可。
4. 为什么要测定蛋白浓度？
根据组织总蛋白质进行归一化的过程相对较快且经济，采用几乎任意标准酶标仪即可实现。
将一部分匀浆液通过 Bradford 或 BCA 蛋白质检测试剂进行定量分析后，可以排除不同组织样本由于匀浆程度差异导致的偏差。
该方法虽然简单易行，但其隐含的假设是，对模型的的任何干预措施都不会明显改变其细胞总蛋白质含量。如果在极端特殊的情况下，模型处理过程会导致线粒体生物合成发生变化，从而改变模型样本中细胞的蛋白质含量，那么这种归一化方法就可能出现问题，可能掩盖真正的活性氧活性差异。如果不同实验组之间的细胞外基质蛋白质含量存在显著差异，则总蛋白质归一化处理不适用。
仅用于科研，不能用于临床诊断！所有产品仅供科研使用，不得用于人或动物的治疗等任何其他用途，不为任何个人提供产品和服务。以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。
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