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植物细胞核和细胞质提取试剂盒-酶法
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详细内容
植物细胞核和细胞质提取试剂盒-酶法
产品货号:XY9-361123
产品规格及价格:50T/1000元;100T/1600元
产品简介:
植物细胞核和细胞质提取试剂盒提供全套试剂,适用于从各种植物细胞和各种实体植物组织,如叶片、根、种子等植物组织中提取核和细胞质。提取过程简单方便,可在1小时内完成。制备的细胞细胞核/细胞质不仅纯度高,保持天然活性,而且绝少交叉污染。
本试剂盒采用酶法提取,酶法提取制备的回收率提高,纯度高,保持天然活性,但是耗时较长。非酶法的提取试剂盒提取过程简单方便,速度快,可在1小时内完成,而且绝少交叉污染,但是回收率相比酶法较低。如果需要更加快捷的提取试剂盒,可以选择非酶法的提取试剂盒(相关产品BB-361122),对提取速度没有要求的话,可以选择酶法提取试剂盒。请根据实际需要选择试剂盒。
可以提供针对动物细胞、组织、植物、真菌、酵母、微生物、藻类、液体、土壤等各种不同样本的蛋白提取试剂盒。
可以提供针对细胞膜、核、胞质、线粒体、溶酶体、高尔基体、内质网、外泌体等细胞不同部位的蛋白提取试剂盒。
可以提供针对下游实验不同应用的试剂盒,例如用于Western Blotting和双向电泳等不同下游应用的试剂盒;含去垢剂成分和不含去污剂成分的蛋白提取试剂盒;专用于蛋白质谱检测、Pull-down实验的试剂盒等总计300多种蛋白提取试剂盒供选择使用。
还可以提供针对动物、植物等不同样本的细胞核、线粒体、溶酶体、叶绿体、外泌体等不同细胞器的提取试剂盒。
产品应用:
根据需要使用

使用方法:
旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落
实验过程中的所有试剂须预冷;所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
可以根据自己实验需要加入其它蛋白酶抑制剂单品。
1.取洗净擦干后并去除叶梗和粗脉的100-200mg鲜嫩植物组织样本用锋利的刀片划成尽可能小的碎片。
【注】: 也可用手术剪刀尽可能剪碎。
2.加入500ul洗涤液A充分混匀。
3.在30℃条件下静置15分钟。
4.在2000×g条件下离心10分钟,弃上清,收集沉淀。
5.在沉淀中加入500ul提取液B,充分混匀。
【注】: 培养细胞1000×g条件下离心5分钟,小心吸取培养基,尽可能吸干,收集细胞后用PBS洗涤2次,然后直接加入提取液B重悬。 大约每300ul细胞压积中加入1ml提取液B。 根据实际样本体积调整提取液用量,一般试剂是样本体积的2-3倍,充分淹没样本即可。
6.将提取液B样本悬液置振荡器上37 -45℃ ℃或室温振荡24⁻⁷2小时。
【注】:使用振荡器/摇床的较低转速,保证提取液能轻微晃动即可。没有振荡条件也可以不振荡,中间每隔几小时用移液器吹打混匀即可。 根据下游核和胞质的应用选择合适的温度,最高温度为55℃时制备速度最快。但是温度过高会影响样本活性,请根据下游应用选择温度。 不同类型的植物样本需要处理的时间差异较大。拟南芥较易处理,鲜嫩叶片较易处理,年龄小的样本处理时间短。 部分细胞壁较厚的植物类型可能需要处理更长时间。可以延长至72小时以上处理以提高得率。
7.在2000×g离心5分钟,弃上清,收集沉淀。
【注】:有条件的话用100um细胞筛网过滤提取液B处理液后,收集滤液再离心。 没有细胞筛可以不过滤。8.用PBS洗涤沉淀一次。
【注】: 在2000×g离心5分钟。
9.在沉淀中加入500ul试剂C重悬沉淀,充分混匀。用匀浆机/匀浆器匀浆。
10.置4℃振荡20-30分钟。
【注】:用振荡器/摇床的较低转速,保持液体稍微有晃动即可。没有低温振荡条件可以不振荡,在2-8℃静置,稍微延长处理时间,中间每隔几分钟用移液器吹打混匀。
11.在4℃,800×g力条件下离心5分钟。
12.移除上清至另一干净离心管。上清为细胞质部分,沉淀为细胞核。13.用相应的缓冲液重悬细胞核沉淀,将两个样本置冰箱备用或直接用于下游实验。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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