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非水溶性蛋白提取试剂盒

价格：￥ 50T/900元；100T/1600元

品牌名称：$brandModel.Title型号：原产地：中国大陆更新时间：2026/10/19 10:46:42

产品摘要：非水溶性蛋白提取试剂盒提供全套试剂，适用于从各种动物实体组织，如脑、脊髓、神经结或纤维、脂肪、肝脏、消化道、肾脏、心脏、肌肉、血管、结缔组织等动物组织样品中提取水不可溶蛋白。

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非水溶性蛋白提取试剂盒

产品货号：XY9-311913

产品规格及价格：50T/900元；100T/1600元

产品简介：

非水溶性蛋白提取试剂盒提供全套试剂，适用于从各种动物实体组织，如脑、脊髓、神经结或纤维、脂肪、肝脏、消化道、肾脏、心脏、肌肉、血管、结缔组织等动物组织样品中提取水不可溶蛋白。
本试剂盒含有的独特配方能够有效溶解细胞膜、骨架等不可溶蛋白组份，包括细胞质膜、核膜、各种细胞器膜和骨架等不可溶蛋白组份。本试剂盒含有的蛋白酶抑制剂混合物，阻止了蛋白酶对蛋白的降解，为提取高纯度的蛋白提供了保证。
本试剂盒提取的蛋白可用于Western Blotting、蛋白质电泳、免疫沉淀、ELISA实验等下游蛋白研究实验。
本试剂盒提取的蛋白为变性蛋白，需要具有天然蛋白构象的活性非水溶性蛋白，请使用其他货号的试剂盒。
本试剂盒中不含有EDTA，与金属螯和层析等下游应用兼容。
本试剂盒提取的蛋白样本含有高浓度的盐成分，不可直接用于2D电泳，如下游实验需要直接用于等电聚焦、双向电泳，请使用其他货号的试剂盒。也可以将样品除盐后再用于2D电泳，用脱盐柱脱盐处理。

使用方法：

1.预实验很重要。必须要做预实验，在正式实验之前取少量样本优化实验条件，并像正式样本一样认真进行，看实验结果是否可行，实验条件是否适合自己的样本。由于生物样本的多样性，不同样本的实验条件通常差异较大，同种细胞的不同模型下需要的实验条件也可能不同，为了避免浪费正式样本和试剂，一定要提前预实验优化实验条件。

2. 旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。

3. 蛋白酶抑制剂在 2-8℃时是固体状态，从冰箱取出后恢复至室温或 37℃短时间水浴，变成液体状态后离心至管底部再开盖。

4. 实验过程中的所有试剂须预冷；所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。

5. 蛋白酶抑制剂储存期间溶液如果出现沉淀，不影响使用，溶解后正常使用。

6. 如果试剂盒不能短时间内用完，蛋白酶抑制剂混合物不可以一次全部加入提取液。

7. 可以根据自己实验需要加入其它蛋白酶抑制剂单品。
8.下游实验如果是进行特定蛋白酶或磷酸酶的酶活性检测，提取液可以不加蛋白酶抑制剂或磷酸酶抑制剂，注意提取过程保持低温操作，缩短离心时间。
9.Western Blot实验内参可以选用beta-actin、GAPDH、Tubulin。
10.离心机转速有相对离心力（RCF，×g）和每分钟转速（RPM，r/min）两种表示方式，有些离心机设置有RPM和×g显示切换，但部分离心机没有自动切换功能。需要用下面的公式进行换算：i.g=r×1.118×10-5×rpm2（r为有效离心半径，即从离心机轴心到离心收集管底部中心位置的长度，单位为厘米)例如:转速为3000 rpm，有效离心半径为10 cm，则相对离心力（RCF，×g）为=10×1.118×10-5×30002=1006.2（×g）。

1. 提取液准备：

每 500 µl 冷的蛋白提取液中加入 2 µl 蛋白酶抑制剂混合物，混匀后置冰上备用。

2. 取 50-100 mg 组织样本，用 PBS 洗干净，然后用手术剪刀尽可能剪碎，加入 500 µl 匀浆液 A，用组织匀浆器/匀浆机匀浆至无明显肉眼可见固体。

3. 将组织匀浆在 14000×g 条件下离心 25 分钟。弃上清，留沉淀。

4. 用 0.5 ml 洗涤液重悬沉淀。在 14000×g 条件下离心 25 分钟。弃上清，留沉淀。

5. 用 0.5 ml 洗涤液重悬沉淀。在 14000×g 条件下离心 25 分钟。弃上清，留沉淀。

6. 在沉淀中加入 0.3 ml 蛋白提取液，充分混匀。在 4℃条件下振荡 30-60 分钟。

7. 在 4℃，10000-14000×g 条件下离心 15 分钟。

8. 将上清吸入另一预冷的干净离心管，即得到总不可溶蛋白。

9. 将上述蛋白提取物定量后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验

常见问题分析

1. 蛋白浓度低？

处理部分组织样本时可能没有裂解完全，导致蛋白浓度低。只要适当延长蛋白提取液的处理时间即可。在持续振荡的条件下处理，没有振荡器也可间隔几分钟用吸头吹打混匀。

2. 用什么方法定量蛋白？

建议用 BCA 法。不适合用 Bradford 法，因为试剂中含有干扰 Bradford 法的组份，导致定量不准。如果已经进行过透析处理或者用脱盐柱改换过缓冲体系，则可以用 Bradford 法定量。

3. 提取的蛋白具有活性吗？

本试剂盒不含有离子型去垢剂组份，不破坏蛋白的结构，没有对蛋白质之间原有的相互作用的破坏，蛋白均保持其天然构象和活性。

仅用于科研，不能用于临床诊断！所有产品仅供科研使用，不得用于人或动物的治疗等任何其他用途，不为任何个人提供产品和服务。以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。

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