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详细内容
血小板蛋白提取试剂盒
产品货号:XY9-31401
产品规格及价格:50T/700元;100T/1100元
产品简介:
血小板蛋白提取试剂盒适用于从各种动物血小板中提取总蛋白。提取过程简单方便,可在 1 小时内完成。
本试剂盒含有的独特配方能够有效溶解膜组份。本试剂盒含有的蛋白酶抑制剂混合物,阻止了蛋白酶对蛋白的降解,为提取高纯度的蛋白提供了保证。
本试剂盒提取的蛋白可用于 Western Blotting、蛋白质电泳、免疫沉淀、ELISA、转录活性分析、Gel shift 凝胶阻滞实验、酶活性测定等下游蛋白研究实验。
本试剂盒提取的蛋白为具有天然蛋白构象的活性蛋白。
产品应用:
WB,IP 等
产品特点:
1.使用方便,将蛋白提取的时间缩短至 30 分钟。
2.含蛋白稳定剂,提取的蛋白稳定。
3.紫外检测蛋白浓度时,背景干扰低。

使用方法:
使用注意事项:
1.旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落。
2.实验过程中的所有试剂须预冷;所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
3.蛋白酶抑制剂储存期间溶液如果出现沉淀,不影响使用,溶解后正常使用。
4.以下血小板收集方法仅供参考。有条件时可以使用全自动血小板分离机分离血小板,可以使用凝胶过滤法收集,降低活化程度。也可使用实验室常用的方法或者根据文献选择方法。
5.血小板蛋白回收率大约70-80%。
1. 取 1-5 ml ACD 抗凝血,室温 200×g 离心 10 分钟。
2. 收集上层血浆,弃下层血液细胞沉淀层。
3. 将上层血浆层室温 200×g 离心 5 分钟。
4. 上层血浆室温 3000×g 离心 10 分钟。
5. 弃上清,沉淀中加入 500 µl 血小板洗涤液 B 洗涤一次,3000×g 离心 10 分钟。
6. 弃上清,沉淀中加入 200-500 µl 冷的蛋白提取液 A 和 2 µl 蛋白酶抑制剂混合物,吹打混匀后,在 4℃条件下振荡 20 分钟。
7. 在 4℃,12000-16000×g 条件下离心 15 分钟。
8. 将上清吸入另一预冷的干净离心管,即可得到血小板蛋白。
9. 将上述蛋白提取物定量后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验。
常见问题分析:
1.蛋白浓度低?
处理部分组织样本时可能没有裂解完全,导致蛋白浓度低。只要适当延长试剂 A 的处理时间即可。在持续振荡的条件下处理,没有振荡器也可间隔几分钟用吸头吹打混匀。
2.用什么方法定量蛋白?
建议用 BCA 法。不适合用 Bradford 法,因为试剂 A 中含有干扰 Bradford 法的组份,导致定量不准。如果已经进行过透析处理或者用脱盐柱改换过缓冲体系,则可以用 Bradford 法定量。
3.提取的蛋白具有活性吗?
本试剂盒不含有离子型去垢剂组份,不破坏蛋白的结构,没有对蛋白质之间原有的相互作用的破坏,蛋白均保持其天然构象和活性。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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