除了血浆和血清，还有哪些样本类型可以用于ELISA实验?

ELISA 常用样本类型

1. 体液类

全血：较少直接使用，一般需预处理去除红细胞干扰；溶血会释放血红蛋白，容易造成非特异性吸附、升高背景，尽量优先分离血清 / 血浆后再测。

脑脊液 CSF：蛋白浓度低，样本量通常偏少，需要选用高灵敏度试剂盒；注意避免血细胞污染。

尿液：基质复杂、靶标浓度波动大，存在尿素、盐离子干扰，常需要浓缩，同时要记录肌酐用于校正。

胸腔积液、腹水、关节滑液：蛋白含量高，部分样本含大量纤维蛋白，容易凝固，需要离心去除细胞与絮状物，必要时过滤。

唾液：采集，但靶标浓度偏低、基质干扰强，需注意样本中淀粉酶、黏蛋白带来的非特异结合。

乳汁：含大量脂肪、乳蛋白，离心去除乳脂层，避免脂滴包被抗原或吸附抗体造成结果偏差。

支气管肺泡灌洗液 BALF：细胞碎片、黏液多，必须充分离心，取上清检测；蛋白浓度通常较低。

2. 组织样本

组织匀浆上清：动物 / 人体组织（脾脏、肝脏、肿瘤、骨、肌肉等），用裂解液研磨匀浆，离心取上清。关键点：蛋白酶抑制剂必须添加，防止靶标蛋白降解；同时用 BCA 测定总蛋白，结果常用每毫克总蛋白标准化。

FFPE 石蜡组织一般不直接用于常规抗原定量 ELISA，多用于 IHC；若要做，需要脱蜡、抗原提取，回收率不稳定，很少用。冰冻组织适合做匀浆 ELISA。

3. 细胞相关样本

细胞培养上清：检测细胞分泌型蛋白（细胞因子、外泌体相关蛋白等），离心去除细胞碎片；注意培养基中的血清、BSA 基质干扰。

细胞裂解液：贴壁 / 悬浮细胞裂解后离心上清，检测胞内蛋白，同样需要加蛋白酶抑制剂，定量总蛋白校正。

外泌体提取物：分离纯化后的外泌体裂解上清，检测外泌体膜蛋白或内含蛋白。

4. 其他样本

腹水、腹腔灌洗液：离心去除细胞沉淀，取上清；容易有纤维蛋白析出。

眼房水：微量样本，低丰度蛋白，高灵敏度试剂盒。

植物样本匀浆（植物 ELISA）：植物组织研磨上清，多酚、多糖是主要干扰物，常需要 PVP 等去除多酚干扰。

核心注意要点

所有样本都要去除细胞、碎片、絮状物，推荐高速离心，必要时 0.22μm 过滤，防止堵板、非特异吸附。

脂血、溶血、黄疸样本尽量规避；若无法避免，一定要做基质效应评估。

反复冻融会降解蛋白，尽量分装，避免多次冻融。

不同基质（尿液、唾液、组织匀浆）基质效应差异很大，用对应基质做标准品稀释，而不是单纯 PBS，否则定量不准。

原创作者：上海笃玛生物科技有限公司