(1)需要长期保存的血清必须储存于-20℃ - 70℃ 低温冰箱中。4℃冰箱中保存时间切勿超过1个月。由于血清结冰时体积会增加约10%，因此，血清在冻入低温冰箱前，必须预留一定体积空间，否则易发生污染或玻璃瓶冻裂。(2)一般厂商提供的血清为无菌，无需再过滤除菌。如发现血清有悬浮物，则可将血清加入培养液内一起过滤，切勿直接过滤血清。(3)瓶装血清解冻需采用逐步解冻法:-20℃ ......

 细胞培养中常用培养基及基本特性1、rpmi-1640 mediumrpmi-1640广泛应用于哺乳动物、特殊造血细胞、正常或恶性增生的白细胞，杂交瘤细胞的培养，是目前应用十分广泛的培养基。主要用于悬浮细胞培养。其它像k-562、hl-60、jurkat、daudi、im-9等成淋巴细胞、t细胞淋巴瘤细胞以及hct-15上皮细胞等均可参考使用。2、minimum es......

 器材与试剂干粉型培养基、胰蛋白酶，青霉素、链霉素. 纯净水系统、电子天平、ph计、磁力搅拌器等具体步骤1. 水：细胞培养用水必须非常纯净，不含有离子和其他的杂质。需要用新鲜的双蒸水、三蒸水或纯净水.2. pbs (也可用于其它bss，如：hanks，d-hanks液的配制)：主要用于免疫组化染色时组织或细胞的漂洗溶解定容：将药品(nacl 8.0g，kcl 0.2g，na2hpo4&m......

 免疫标记技术是将一些既易测定又具有高度敏感性的物质标记到特异性抗原或抗体分子上，通过这些标记物的增强放大效应来显示反应系统中抗原或抗体的性质与含量。常用的标记物包括荧光素、酶和放射性核素等，用这3种标记物进行标记的免疫检测技术被称为3大免疫标记技术。目前，使用的免疫标记物还有化学发光物质、铁蛋白和胶体金等。1.原理辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase, hrp)......

elisa试剂盒使用注意事项：1. elisa试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。4．请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔......

昆虫卵磷脂(lec)elisa试剂盒实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中昆虫卵磷脂（lec）水平。用纯化的昆虫卵磷脂（lec）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入卵磷脂（lec） ，再与 hrp 标记的卵磷脂（lec）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物 tmb 显色。tmb 在&nb......

elisa方法竞争抑制法普遍存在的操作问题： 两对半使用elisa方法，其中hbsag、hbsab、hbeag使用双抗原/抗体夹心法检测，而hbcab、hbeab使用竞争抑制法检测。 而竞争抑制法的原理：酶标抗体与样本抗体在同样的体系中，与固相抗原竞争结合是等比关系。原论上讲，应该先将样本与酶标抗体先行混匀，然后加入反应也进行。但实际工作中并非如此，都是分开加入反应孔。这样会造成先加入的......

 仓鼠白细胞介素6 (il-6)elisa试剂盒注意事项（1）．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡 15-30 分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。（2）．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。（3）．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间最好控制在 5 ......

一、双抗体夹心法原理：elisa双抗体夹心法(enzyme linked immunosorbent assay——sandwich technique)的原理是将特异性抗体结合到固相载体上形成固相抗体，然后和待检血清中的相应抗原结合形成免疫复合物，洗涤后再加酶标记抗体，与免疫复合物中抗原结合形成酶标抗体-抗原-固相抗体复合物，加底物显色，判断抗原含量。以检测hb......

 大部分elisa 检测均以血清为标本。血清标本可按常规方法采集，应注意避免溶血，红细胞溶解时会释放出具有过氧化物酶活性的物质，以hrp 为标记的elisa 测定中，溶血标本可能会增加非特异性显色。血清标本宜在新鲜时检测。如有细菌污染，菌体中可能含有内源性hrp，也会产生假阳性反应。一般说来，在5 天内测定的血清标本可放置于4℃，标本在冰箱中保存时间过长导致血清igg 聚合，使......

 il-8是一种分子量为8～10kd的多肽，对嗜中性粒细胞，t淋巴细胞、嗜硷性粒细胞具有趋化作用，并可激活嗜中性粒细胞，是一种重要的炎症介质。在严重感染病人的血清中、炎症局部渗出液中都可检测到高水平的il-8。此外，近年来的研究表明，il-8可能与各种组织缺血后再灌注损伤的发生有关。我们采用两株自制的单克隆抗体建立了夹心法elisa用于检测il-8，敏感性可达156pg/ml，操作简单，......

 elisa 试验以灵敏度较高、特异性较好的特点在临床上得到了广泛的应用，但操作中的各个环节对试验的检测效果影响较大，如不注意，有可能导致显色不全、花板等结果。我将操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下：下面分析elisa试验操作中可能影响结果的原因，并给出相应的解决办法1. 选择试剂选择质量优良的检测试剂，严格按照试剂说明书进行操作，操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。2......

 elisa是酶联接免疫吸附剂测定( enzyme-linked immunosorbnent assay )的简称。它是继免疫荧光和放射免疫技术之后发展起来的一种免疫酶技术。此项技术自70年代初问世以来，发展十分迅速，目前已被广泛用于生物学和医学科学的许多领域。(一)　原理elisa是以免疫学反应为基础，将抗原、牽9体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性......